目的：調(diào)控細(xì)胞生長基因功能紊亂是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個重要原因。而基因表達(dá)調(diào)控是認(rèn)識細(xì)胞如何分化和細(xì)胞如何癌變的關(guān)鍵機制。近來研究表明組蛋白的修飾參與調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的活化及抑制，改變?nèi)旧w狀態(tài)，進(jìn)而影響細(xì)胞的生長周期、腫瘤的發(fā)生發(fā)展。盡管目前發(fā)現(xiàn)組蛋白存在乙酰化、磷酸化位點，但對其甲基化及其作用機制卻知之甚少。本研究以生物信息學(xué)為基礎(chǔ)，從人體胎兒組織中克隆得到組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶（HMT）家族新成員SET07基因，并研究其結(jié)構(gòu)及理化特征、生物學(xué)功能，與個體發(fā)育、腫瘤發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系，為深入探討組蛋白甲基化．染色質(zhì)-腫瘤之間的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。方法：首先采用“電子”cDNA文庫篩選法，獲得一新基因，并對其生化性質(zhì)進(jìn)行了理論預(yù)測。在此基礎(chǔ)上，通過RT-PCR方法從胎兒脾臟中擴(kuò)增得到該基因cDNA序列，并對其進(jìn)行一系列的理化性質(zhì)研究，包括Northern Blot鑒定其轉(zhuǎn)錄子的大小、構(gòu)建了含有GST標(biāo)簽的SET07原核表達(dá)載體、高質(zhì)量融合蛋白表達(dá)為制備抗體和功能實驗奠定了良好的基礎(chǔ)，制備抗SET07多克隆抗體、Western Blot等實驗對其蛋白水平的表達(dá)進(jìn)行了觀察。最后，針對SET07是否具有組... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
實驗技術(shù)路線
第一部分 SET07基因的生物信息學(xué)分析
    實驗?zāi)康?br>    實驗方法
    實驗結(jié)果
    實驗討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 SET07基因理化性質(zhì)初步研究
    實驗?zāi)康?br>    實驗方法
    實驗結(jié)果
    實驗討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 SET07基因功能的初步研究
    實驗?zāi)康?br>    實驗方法
    實驗結(jié)果
    實驗討論
    參考文獻(xiàn)
總結(jié)
附錄
文獻(xiàn)綜述
后記



本文編號：3190473