目的:本研究用一種雜交瘤皿,根據(jù)內(nèi)皮祖細胞集落形成單位（endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs）的形態(tài)特征和EPCs表面特異性標(biāo)記物分離EPCs。方法:取大鼠股骨、脛骨骨髓,將全骨髓接種在聚苯乙烯材料的雜交瘤皿上,培養(yǎng)4-7天后出現(xiàn)干細胞集落單位（stem cells colony-forming units）,在顯微鏡下將這些集落分別挑選出來后,取單個集落的一部分細胞,免疫熒光鑒定EPCs表面特異性標(biāo)記物CD133/VEGFR-2。CD133/VEGFR-2雙陽性即為EPCs-CFU。另一部分繼續(xù)傳代增殖,流式細胞術(shù)鑒定CD133/VEGFR-2/CD34。并把此方法定義為微孔法。結(jié)果:全骨髓接種后第4天,顯微鏡下可見明顯的CFUs。免疫熒光鑒定7.33±2.51%（n=5）的CFUs為CD133+/VEGFR-2+ EPCs-CFUs,進一步傳代培養(yǎng),流式細胞術(shù)鑒定CD133/VEGFR-2雙陽性率為73.28±7.43%, CD34/CD133雙陽性率為70.36±10.17% （n=3）。傳代細胞可... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
正文
    引言
    第一部分 大鼠骨髓源CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+EPCs的分離、純化與鑒定
        1. 材料與方法
        2. 結(jié)果
            2.1 大鼠骨髓EPCs 的形態(tài)特點
            2.2 大鼠骨髓EPCs 的鑒定
        3. 討論
        4. 小結(jié)
    第二部分 SDF-1α 對 CD133~+/VEGFR-2~+/CD34~+ EPCs 增殖、遷移、黏附、血管樣結(jié)構(gòu)形成及凋亡的影響
        1. 材料和方法
        2. 結(jié)果
            2.1 SDF-1α促進EPCs 增殖、遷移和黏附
            2.2 SDF-1α促進EPCs血管樣結(jié)構(gòu)形成
            2.3 SDF-1α對次級EPCs-CFUs數(shù)目和大小的影響
            2.4 SDF-1α 抑制 Ox-LDL 致 EPCs 凋亡
            2.5 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
            2.6 SDF-1α 對 CXCR4 mRNA 和蛋白表達的影響
        3. 討論
        4. 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述
碩士期間已發(fā)表及擬發(fā)表的文章
致 謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]用CD133免疫磁珠分離臍血內(nèi)皮祖細胞的實驗研究[J]. 張威,周莉,金惠銘,曲曉義,張國平,殷蓮華,朱大年.  中國病理生理雜志. 2005(09)
[2]趨化因子基質(zhì)細胞衍生因子1（SDF-1）及其受體CXCR4[J]. 楊文博.  免疫學(xué)雜志. 2003(S1)



本文編號：3183240