目的探討Sulfiredoxin-1（Srxn1）對氧糖剝奪/復(fù)氧（oxygen-glucose20deprivation/reoxygenation,OGD/R）誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。方法201應(yīng)用RNAi技術(shù)將Srxn1干擾小發(fā)夾RNA（shRNA）及陰性載體（negative20control）轉(zhuǎn)染至星形膠質(zhì)細(xì)胞,Real-time20quantitative20PCR（QPCR）和Western20blot檢測轉(zhuǎn)染后Srxn1的基因和蛋白表達(dá)水平;2實驗分為control組、control+OGD/R組、negative20control（NC）+OGD/R組、sh-Srxn1+OGD/R組（n=3）,細(xì)胞轉(zhuǎn)染7220h后建立OGD模型,620h后予以復(fù)氧,模擬再灌注模型;3復(fù)氧1220h后,MTS法檢測細(xì)胞活性,Hoechst2033342檢測細(xì)胞凋亡率,Western20blot檢測細(xì)胞Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果201shRNA-Srxn1轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,與空白組和陰性組比較,干擾組Srxn120mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯降低,分別降低47%和58.5%... 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2014,36(21)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)
    1.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
    1.4 實驗分組及設(shè)計
    1.5 氧糖剝奪/復(fù)氧模型的建立
    1.6 q PCR檢測Srxn1的mRNA表達(dá)水平
    1.7 Western blot檢測Srxn1、Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá)水平
    1.8 MTS檢測細(xì)胞活性
    1.9 GFAP/Hoechst 33342染色檢測細(xì)胞純度和凋亡情況
    1.1 0 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞純度鑒定及轉(zhuǎn)染效率鑒定
    2.2 Western blot和q PCR檢測shRNA-Srxn1干擾效果
    2.3 Srxn1干擾對OGD/R損傷后細(xì)胞活性的影響
    2.4 Srxn1干擾對OGD/R損傷后細(xì)胞凋亡的影響
    2.5 Srxn1干擾對OGD/R損傷后Bcl-2和Bax表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Sulforaphane20protects20primary20cultures20of20cortical20neurons20against20injury20induced20by20oxygen-glucose20deprivation/reoxygenation20via20anti-apoptosis[J]. Xuemei Wu 1 , Jing Zhao 2 , Shanshan Yu 1 , Yanlin Chen 1 , Jingxian Wu 1 , Yong Zhao 1 1 Department of Pathology, 2 Department of Pathophysiology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China.  Neuroscience Bulletin. 2012(05)
[2]萊菔硫烷對神經(jīng)元氧糖剝奪/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用[J]. 吳雪梅,巫靜嫻,喻姍姍,趙敬,趙涌.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2011(18)



本文編號：3178433