目的:探討促性腺激素抑制激素（Gn IH/RFRP-3）對卵巢摘除術補充雌激素（OEP）大鼠下丘腦阿片-促黑素細胞皮質素原（POMC）陽性神經元的影響。方法:65只成年雌性SD大鼠,隨機選取2只用于免疫熒光多重染色,觀察Gn IH/RFRP-3與POMC在大鼠下丘腦神經元的表達;隨機選取3只用于免疫共沉淀（Co-IP）實驗,檢測Gn IH/RFRP-3與POMC的相互作用;余下60只建立卵巢摘除術補充雌激素（OEP）大鼠模型,模型組隨機分成注射Gn IH實驗組和生理鹽水對照組,每組30只,每組根據注射時間不同分為20、40、60、120、240、360min等共6個亞組,每組5只,采用Western Blot法檢測Gn IH/RFRP-3處理對下丘腦POMC表達的影響。結果:免疫熒光多重標記結果顯示,Gn IH/RFRP-3與POMC共表達于大鼠下丘腦神經元; Co-IP結果證明,Gn IH/RFRP-3與POMC存在相互作用; Western Blot結果表明,注射Gn IH/RFRP-3后20 min組大鼠下丘腦POMC蛋白表達量顯著高于對照組（P <0. 05）,注射60、... 

【文章來源】：神經解剖學雜志. 2019,35(01)北大核心CSCD

【文章頁數】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑與儀器
    2 方法
        2.1 實驗動物分組
        2.2 制備卵巢摘除術后補充雌激素 (OEP) 大鼠模型及側腦室注射
        2.3免疫熒光多重標記方法檢測GnIH/RFRP-3與POMC在下丘腦神經元的表達
        2.4 免疫共沉淀 (Co-immunoprecipitation, Co-IP) 檢測GnIH/RFRP-3與POMC的相互作用
        2.5 Western Blot檢測POMC蛋白表達
        2.6 統(tǒng)計學分析
結果
    1GnIH/RFRP-3與POMC共表達于下丘腦同一神經元內
    2 Gn IH/RFRP-3與POMC存在相互作用
    3 Gn IH/RFRP-3抑制POMC蛋白表達
討論



本文編號：3174260