隨著重組抗體技術(shù)的發(fā)展，人鼠嵌合抗體、人源化抗體在臨床的使用已初顯成效。治療用抗體的核心問題是抗體蛋白的完全人源化，以消除用于人體時產(chǎn)生的HAMA反應(yīng)或其他并發(fā)癥，而完全的人源抗體完全避免了鼠源成分，是未來臨床應(yīng)用的必要形式。人源抗體得以有效應(yīng)用的關(guān)鍵在于其低免疫原性以及保留了對抗原的特異性結(jié)合的生物學(xué)特性，正成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。 以噬菌體表面呈現(xiàn)技術(shù)制備抗體片段，如Fabs或單鏈Fv，是1990年由McCafferty等最先報道的。通常利用各種噬菌體載體、基因融合技術(shù)，連同PCR擴(kuò)增技術(shù)，建立組合抗體文庫，再利用供者文庫建立針對某一特定抗原的子文庫，是近年來形成的最新方法，從而回避了雜交瘤技術(shù)和免疫。 人源抗體制備的瓶頸是獲得高表達(dá)、高產(chǎn)量、高活性抗體。前期的研究表明，以pComb3為載體的抗體片段表達(dá)無法避免較高的基礎(chǔ)表達(dá)，難以達(dá)到上述的理想制備。本課題引入了一個新的策略，即以pBAD/gⅢ為載體重新克隆抗—HBs Fab基因。這個系統(tǒng)的主要特點(diǎn)在于①在無誘導(dǎo)劑的條件下，表達(dá)水平很低，②存在誘導(dǎo)劑的情況下，獲得適度地高表達(dá)水平，③調(diào)節(jié)表達(dá)地誘導(dǎo)劑濃度范圍很寬，④表達(dá)系統(tǒng)... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
    中文摘要
    英文摘要
前言
論文
    第一部分 人源生物工程抗-HBsFab的克隆與表達(dá)
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第二部分 表達(dá)和純化人源抗-HBsFab的條件選擇
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人源性抗HBsAg單克隆抗體Fab片段的制備及其純化[J]. 范列英,韓煥興,胡東平,孔憲濤.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 1997(04)
[2]人源抗HBsAg單克隆抗體組合文庫的建立[J]. 韓煥興,孔憲濤.  中國免疫學(xué)雜志. 1996(05)



本文編號：3166239