FcγRⅡb抑制登革病毒prM抗體引起的抗體依賴增強作用的研究
發(fā)布時間:2021-04-27 00:28
一、研究背景和目的登革病毒病流行于熱帶和亞熱帶地區(qū),最近幾十年發(fā)病率在全球大幅度上升。占世界人口40%以上的約25億人面臨罹患登革的危險。世衛(wèi)組織估計,每年世界上可能有5000萬至1億登革病毒感染病例,是分布最廣、發(fā)病人數(shù)最多、危害較大的一種蟲媒病毒性疾病。2014年12月廣東衛(wèi)生和計劃生育委員會報告全年登革熱病例約45000多人,且出現(xiàn)了不少重癥登革的病例,因尚無有效藥物和疫苗,只能對癥治療,致使死亡率高。因此,登革病毒病已成為全球性的公共衛(wèi)生問題,控制病毒感染刻不容緩。重癥登革的致病機理迄今尚未闡明,抗體依賴性感染增強作用(antibody dependent enhancement; ADE)在登革病毒致病機理、免疫學(xué)和疫苗學(xué)研究中占據(jù)統(tǒng)治地位,這一理論認(rèn)為表面具有Fc受體的單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)是登革病毒的主要靶細(xì)胞,登革病毒與其特異抗體形成復(fù)合物,再通過抗體的Fc段與單核吞噬細(xì)胞表面的FC受體結(jié)合,進入細(xì)胞并復(fù)制,從而導(dǎo)致病毒載量增加。登革病毒在增殖過程中能夠同時產(chǎn)生成熟顆粒和未成熟顆粒。prM抗體介導(dǎo)ADE效應(yīng)的作用機制主要與未成熟病毒顆粒有關(guān)。電鏡及功能學(xué)研究表明,未成熟病毒顆...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 DENV-1 prM抗體的制備與純化
一 材料
二 方法
三 結(jié)果
3.1 prM基因的RT-PCR擴增
3.2 重組表達(dá)載體PCR與雙酶切鑒定
3.3 prM蛋白表達(dá)與純化
3.4 抗體純化與效價檢測
3.5 抗體純度與特異性鑒定
四 討論
第三章 Fc γ RⅡb對DENV ADE抑制作用的研究
一 材料
二 方法
三 結(jié)果
3.1 PCR鑒定真核表達(dá)載體中Fc γ RⅡa與Fc γ RⅡb
3.2 BHK-21細(xì)胞上單獨表達(dá)和共表達(dá)Fc γ RⅡa與Fc γ RⅡb
3.3 ADE相關(guān)免疫復(fù)合物制備
3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測不同細(xì)胞模型ADE效應(yīng)
四 討論
參考文獻(xiàn)
附錄
碩士期間獲得成果
致謝
本文編號:3162408
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 DENV-1 prM抗體的制備與純化
一 材料
二 方法
三 結(jié)果
3.1 prM基因的RT-PCR擴增
3.2 重組表達(dá)載體PCR與雙酶切鑒定
3.3 prM蛋白表達(dá)與純化
3.4 抗體純化與效價檢測
3.5 抗體純度與特異性鑒定
四 討論
第三章 Fc γ RⅡb對DENV ADE抑制作用的研究
一 材料
二 方法
三 結(jié)果
3.1 PCR鑒定真核表達(dá)載體中Fc γ RⅡa與Fc γ RⅡb
3.2 BHK-21細(xì)胞上單獨表達(dá)和共表達(dá)Fc γ RⅡa與Fc γ RⅡb
3.3 ADE相關(guān)免疫復(fù)合物制備
3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測不同細(xì)胞模型ADE效應(yīng)
四 討論
參考文獻(xiàn)
附錄
碩士期間獲得成果
致謝
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