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去迷走神經(jīng)對(duì)大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-16 09:04

  本文關(guān)鍵詞:去迷走神經(jīng)對(duì)大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表達(dá)的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究去迷走神經(jīng)對(duì)大鼠再生肝中Atf3和Nr2f1的表達(dá)影響,進(jìn)一步探討迷走神經(jīng)在肝再生過程中的作用及其調(diào)控機(jī)制。方法:將108只雄性大鼠分為隨機(jī)的2組:PH組:2/3肝切除組;PHV組:去迷走神經(jīng)2/3肝切除組。分別在術(shù)后0h、2h、12h、24h、36h、48h、72h、120h、168h處死,取大鼠的肝臟并分成兩份,一份保存在中性福爾馬林試劑中,另一份保存于液氮中。用免疫組織化學(xué)方法和免疫印跡法(Western Blot)檢測肝組織中Atf3和Nr2f1蛋白的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量法(RT-PCR)檢測肝組織中Atf3mRNA和Nr2f1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果:(1)免疫組化法檢測大鼠再生肝中Atf3的表達(dá):PHV組大鼠在術(shù)后24h~36h的陽性表達(dá)量明顯高于PH組(P0.01),在12h和48h表達(dá)量低于PH組。(2)免疫組化法檢測大鼠的再生肝中Nr2f1的表達(dá):相對(duì)于PH組來說,PHV組大鼠的表達(dá)量在術(shù)后12h、36h、48h、72h、168h低于PH組,在術(shù)后2h、24h、120h處表達(dá)量稍高于PH組,36h表達(dá)量上升到最高,在術(shù)后12h、48h和168h時(shí)與PH組有顯著性差異(P0.05)。(3)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Atf3 mRNA的表達(dá)結(jié)果:與PH組相對(duì)比,PHV組的大鼠術(shù)后24h~36h肝組織內(nèi)Atf3 mRNA的表達(dá)量上升,且高于PH組,在術(shù)后2h、36h和120h有顯著性差異(P0.05)。(4)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1 mRNA的表達(dá)結(jié)果:與PH組相對(duì)比,PHV組的大鼠,手術(shù)后Nr2f1 mRNA的表達(dá)量在0h~168h基本都低于PH組,在術(shù)后12h和48h有極顯著差異(P0.05)。(5)WB法檢測大鼠的再生肝組織中Atf3的蛋白的表達(dá)結(jié)果:與PH組相對(duì)比,PHV組大鼠手術(shù)后至48h表達(dá)量高于PH組,在48h~120h表達(dá)量低于PH組,有顯著性差異(P0.05)。(6)WB法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1的蛋白表達(dá)結(jié)果:與PH組相比,PHV組大鼠術(shù)后Nr2f1的蛋白量表達(dá)變化與PH組的變化相似,但整體都比PH組的表達(dá)量低,與PH組相比有顯著性差異(P0.01)。結(jié)論:(1)研究結(jié)果進(jìn)一步提示去迷走神經(jīng)可能對(duì)大鼠肝組織再生起促進(jìn)作用。(2)去迷走神經(jīng)對(duì)大鼠肝再生的促進(jìn)作用,可能是通過促進(jìn)再生肝組織中Atf3的表達(dá),抑制再生肝組織中Nr2f1的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。II
【關(guān)鍵詞】:肝再生 去迷走神經(jīng) Atf3 Nr2f1
【學(xué)位授予單位】:河南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-10
  • 縮略語表10-11
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述11-25
  • 1.1 肝臟結(jié)構(gòu)及神經(jīng)分布11-14
  • 1.1.1 肝臟的結(jié)構(gòu)功能11-13
  • 1.1.2 大鼠肝臟的神經(jīng)分布13-14
  • 1.2 迷走神經(jīng)對(duì)肝臟的調(diào)節(jié)作用14-16
  • 1.2.1 迷走神經(jīng)在肝臟中的作用14-16
  • 1.2.2 去迷走神經(jīng)模型的建立16
  • 1.3 肝再生的研究現(xiàn)狀16-20
  • 1.3.1 大鼠肝再生機(jī)理16-18
  • 1.3.2 雌激素與肝再生18
  • 1.3.3 正負(fù)因子對(duì)肝再生的的調(diào)控18-20
  • 1.4 肝再生的基因組學(xué)20-24
  • 1.4.1 相關(guān)基因在肝再生不同階段的表達(dá)20-21
  • 1.4.2 Atf3與Nr2f1基因的研究現(xiàn)狀21-23
  • 1.4.3 Atf3和Nr2f1基因與肝再生的關(guān)系23-24
  • 1.5 本研究的目的和意義24-25
  • 第二章 材料與方法25-36
  • 2.1 材料25-26
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物25
  • 2.1.2 主要試劑25-26
  • 2.1.3 主要手術(shù)器械26
  • 2.1.4 主要儀器26
  • 2.2 動(dòng)物模型的制備26-28
  • 2.2.1 術(shù)前準(zhǔn)備26-27
  • 2.2.2 對(duì)照組動(dòng)物模型建立27
  • 2.2.3 實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物模型建立27
  • 2.2.4 術(shù)后處理27-28
  • 2.3 免疫組化法檢測Atf3和Nr2f1蛋白的表達(dá)28-29
  • 2.3.1 動(dòng)物取材28
  • 2.3.2 石蠟包埋、制片28
  • 2.3.4 免疫組化法檢測Atf3蛋白的表達(dá)28-29
  • 2.3.5 免疫組化法檢測Nr2f1蛋白的表達(dá)29
  • 2.4 RT-PCR法檢測Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表達(dá)29-32
  • 2.4.1 動(dòng)物取材29
  • 2.4.2 總RNA提取與純化29-30
  • 2.4.3 cDNA合成與純化30-31
  • 2.4.4 RT-PCR引物設(shè)計(jì)31
  • 2.4.5 RT-PCR反應(yīng)31-32
  • 2.5 Western blot法檢測Atf3和Nr2f1蛋白的表達(dá)32-35
  • 2.5.1 動(dòng)物取材32-33
  • 2.5.2 收集蛋白樣品33
  • 2.5.3 蛋白含量測定33-34
  • 2.5.4 Western blot反應(yīng)34-35
  • 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理35-36
  • 第三章 結(jié)果36-45
  • 3.1 免疫組織化學(xué)法檢測再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表達(dá)36-38
  • 3.1.1 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3蛋白的表達(dá)變化36-37
  • 3.1.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1蛋白的表達(dá)變化37-38
  • 3.2 RT-PCR法檢測再生肝Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表達(dá)38-42
  • 3.2.1 Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的RT-PCR結(jié)果38-40
  • 3.2.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3 mRNA表達(dá)變化40-41
  • 3.2.3 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1 mRNA表達(dá)變化41-42
  • 3.3 Western blot法檢測再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表達(dá)42-45
  • 3.3.1Western blot結(jié)果42-43
  • 3.3.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3蛋白的表達(dá)變化43
  • 3.3.3 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1蛋白的表達(dá)變化43-45
  • 第四章 討論45-49
  • 4.1 大鼠去迷走神經(jīng)對(duì)再生肝中Atf3表達(dá)的影響45-46
  • 4.2 大鼠去迷走神經(jīng)對(duì)再生肝中Nr2f1表達(dá)的影響46-49
  • 第五章 結(jié)論49-50
  • 參考文獻(xiàn)50-59
  • 附錄59-65
  • 致謝65-66
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄66-67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 錢偉,伍忍;交感神經(jīng)對(duì)去迷走神經(jīng)大鼠胃泌素釋放的刺激作用[J];生理學(xué)報(bào);1988年04期

2 宋喜秀;;肝臟的功能與常用肝功能檢查的臨床意義[J];人民軍醫(yī);1985年04期


  本文關(guān)鍵詞:去迷走神經(jīng)對(duì)大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):310455

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