去迷走神經(jīng)對大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表達的影響
發(fā)布時間:2017-04-16 09:04
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【摘要】:目的:研究去迷走神經(jīng)對大鼠再生肝中Atf3和Nr2f1的表達影響,進一步探討迷走神經(jīng)在肝再生過程中的作用及其調(diào)控機制。方法:將108只雄性大鼠分為隨機的2組:PH組:2/3肝切除組;PHV組:去迷走神經(jīng)2/3肝切除組。分別在術(shù)后0h、2h、12h、24h、36h、48h、72h、120h、168h處死,取大鼠的肝臟并分成兩份,一份保存在中性福爾馬林試劑中,另一份保存于液氮中。用免疫組織化學方法和免疫印跡法(Western Blot)檢測肝組織中Atf3和Nr2f1蛋白的表達;實時熒光定量法(RT-PCR)檢測肝組織中Atf3mRNA和Nr2f1 mRNA的表達。結(jié)果:(1)免疫組化法檢測大鼠再生肝中Atf3的表達:PHV組大鼠在術(shù)后24h~36h的陽性表達量明顯高于PH組(P0.01),在12h和48h表達量低于PH組。(2)免疫組化法檢測大鼠的再生肝中Nr2f1的表達:相對于PH組來說,PHV組大鼠的表達量在術(shù)后12h、36h、48h、72h、168h低于PH組,在術(shù)后2h、24h、120h處表達量稍高于PH組,36h表達量上升到最高,在術(shù)后12h、48h和168h時與PH組有顯著性差異(P0.05)。(3)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Atf3 mRNA的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組的大鼠術(shù)后24h~36h肝組織內(nèi)Atf3 mRNA的表達量上升,且高于PH組,在術(shù)后2h、36h和120h有顯著性差異(P0.05)。(4)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1 mRNA的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組的大鼠,手術(shù)后Nr2f1 mRNA的表達量在0h~168h基本都低于PH組,在術(shù)后12h和48h有極顯著差異(P0.05)。(5)WB法檢測大鼠的再生肝組織中Atf3的蛋白的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組大鼠手術(shù)后至48h表達量高于PH組,在48h~120h表達量低于PH組,有顯著性差異(P0.05)。(6)WB法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1的蛋白表達結(jié)果:與PH組相比,PHV組大鼠術(shù)后Nr2f1的蛋白量表達變化與PH組的變化相似,但整體都比PH組的表達量低,與PH組相比有顯著性差異(P0.01)。結(jié)論:(1)研究結(jié)果進一步提示去迷走神經(jīng)可能對大鼠肝組織再生起促進作用。(2)去迷走神經(jīng)對大鼠肝再生的促進作用,可能是通過促進再生肝組織中Atf3的表達,抑制再生肝組織中Nr2f1的表達來實現(xiàn)的。II
【關(guān)鍵詞】:肝再生 去迷走神經(jīng) Atf3 Nr2f1
【學位授予單位】:河南師范大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- 縮略語表10-11
- 第一章 文獻綜述11-25
- 1.1 肝臟結(jié)構(gòu)及神經(jīng)分布11-14
- 1.1.1 肝臟的結(jié)構(gòu)功能11-13
- 1.1.2 大鼠肝臟的神經(jīng)分布13-14
- 1.2 迷走神經(jīng)對肝臟的調(diào)節(jié)作用14-16
- 1.2.1 迷走神經(jīng)在肝臟中的作用14-16
- 1.2.2 去迷走神經(jīng)模型的建立16
- 1.3 肝再生的研究現(xiàn)狀16-20
- 1.3.1 大鼠肝再生機理16-18
- 1.3.2 雌激素與肝再生18
- 1.3.3 正負因子對肝再生的的調(diào)控18-20
- 1.4 肝再生的基因組學20-24
- 1.4.1 相關(guān)基因在肝再生不同階段的表達20-21
- 1.4.2 Atf3與Nr2f1基因的研究現(xiàn)狀21-23
- 1.4.3 Atf3和Nr2f1基因與肝再生的關(guān)系23-24
- 1.5 本研究的目的和意義24-25
- 第二章 材料與方法25-36
- 2.1 材料25-26
- 2.1.1 實驗動物25
- 2.1.2 主要試劑25-26
- 2.1.3 主要手術(shù)器械26
- 2.1.4 主要儀器26
- 2.2 動物模型的制備26-28
- 2.2.1 術(shù)前準備26-27
- 2.2.2 對照組動物模型建立27
- 2.2.3 實驗組動物模型建立27
- 2.2.4 術(shù)后處理27-28
- 2.3 免疫組化法檢測Atf3和Nr2f1蛋白的表達28-29
- 2.3.1 動物取材28
- 2.3.2 石蠟包埋、制片28
- 2.3.4 免疫組化法檢測Atf3蛋白的表達28-29
- 2.3.5 免疫組化法檢測Nr2f1蛋白的表達29
- 2.4 RT-PCR法檢測Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表達29-32
- 2.4.1 動物取材29
- 2.4.2 總RNA提取與純化29-30
- 2.4.3 cDNA合成與純化30-31
- 2.4.4 RT-PCR引物設計31
- 2.4.5 RT-PCR反應31-32
- 2.5 Western blot法檢測Atf3和Nr2f1蛋白的表達32-35
- 2.5.1 動物取材32-33
- 2.5.2 收集蛋白樣品33
- 2.5.3 蛋白含量測定33-34
- 2.5.4 Western blot反應34-35
- 2.6 統(tǒng)計學處理35-36
- 第三章 結(jié)果36-45
- 3.1 免疫組織化學法檢測再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表達36-38
- 3.1.1 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3蛋白的表達變化36-37
- 3.1.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1蛋白的表達變化37-38
- 3.2 RT-PCR法檢測再生肝Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表達38-42
- 3.2.1 Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的RT-PCR結(jié)果38-40
- 3.2.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3 mRNA表達變化40-41
- 3.2.3 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1 mRNA表達變化41-42
- 3.3 Western blot法檢測再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表達42-45
- 3.3.1Western blot結(jié)果42-43
- 3.3.2 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Atf3蛋白的表達變化43
- 3.3.3 肝切除和去迷走神經(jīng)再生肝中Nr2f1蛋白的表達變化43-45
- 第四章 討論45-49
- 4.1 大鼠去迷走神經(jīng)對再生肝中Atf3表達的影響45-46
- 4.2 大鼠去迷走神經(jīng)對再生肝中Nr2f1表達的影響46-49
- 第五章 結(jié)論49-50
- 參考文獻50-59
- 附錄59-65
- 致謝65-66
- 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄66-67
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 錢偉,伍忍;交感神經(jīng)對去迷走神經(jīng)大鼠胃泌素釋放的刺激作用[J];生理學報;1988年04期
2 宋喜秀;;肝臟的功能與常用肝功能檢查的臨床意義[J];人民軍醫(yī);1985年04期
本文關(guān)鍵詞:去迷走神經(jīng)對大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表達的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:310455
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