目的：闡明小鼠PTA1（mPTA1）／mCD226對(duì)殺傷性T淋巴細(xì)胞（CTL）分化的影響。確定mPTA1分子與mTage4參與相互作用的結(jié)構(gòu)域，以深入研究這兩種分子的功能。 方法：①利用小鼠PTA1-hIgFc真核表達(dá)載體表達(dá)并純化mPTA1融合蛋白，免疫家兔，獲得抗mPTA1多克隆抗體，并用偶聯(lián)mPTA1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B親和層析柱純化多克隆抗體。間接免疫熒光染色及流式細(xì)胞術(shù)鑒定多克隆抗體的特異性。②通過混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（MLC）誘導(dǎo)產(chǎn)生CTL效應(yīng)細(xì)胞，以⁵¹Cr釋放實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mPTA1多克隆抗體在MLC中對(duì)T淋巴細(xì)胞分化及殺傷功能的影響。③擴(kuò)增編碼mTage4全長(zhǎng)分子和mPTA1、hICAM-1分子不同結(jié)構(gòu)域的DNA序列，構(gòu)建含mTage4和mPTA1不同結(jié)構(gòu)域編碼序列的截短體以及mPTA1／hICAM-1熒光蛋白嵌合體分子基因的真核表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)染COS-7真核細(xì)胞，通過激光掃描共聚焦顯微鏡研究這兩種分子間的相互作用。 結(jié)果：①獲得了mPTA1-hIgFc融合蛋白和針對(duì)mPTA1胞膜外區(qū)的多克隆抗體，該抗體能與轉(zhuǎn)染細(xì)胞表面mP... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PATI和LAF一1復(fù)合物形成動(dòng)態(tài)變化模式圖

mPATI一Fc融合蛋白及mPATI胞膜外區(qū)的SDS一APGE電泳分析

間接EUSA法檢測(cè)免疫兔血清抗mPATI的效價(jià)F191一2Thetiltersofrabbitnati·mPATIsearidentifiedbyindireetELISA


本文編號(hào)：3083565