目的：闡明小鼠PTA1（mPTA1）／mCD226對殺傷性T淋巴細胞（CTL）分化的影響。確定mPTA1分子與mTage4參與相互作用的結構域，以深入研究這兩種分子的功能。 方法：①利用小鼠PTA1-hIgFc真核表達載體表達并純化mPTA1融合蛋白，免疫家兔，獲得抗mPTA1多克隆抗體，并用偶聯(lián)mPTA1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B親和層析柱純化多克隆抗體。間接免疫熒光染色及流式細胞術鑒定多克隆抗體的特異性。②通過混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）誘導產(chǎn)生CTL效應細胞，以⁵¹Cr釋放實驗檢測mPTA1多克隆抗體在MLC中對T淋巴細胞分化及殺傷功能的影響。③擴增編碼mTage4全長分子和mPTA1、hICAM-1分子不同結構域的DNA序列，構建含mTage4和mPTA1不同結構域編碼序列的截短體以及mPTA1／hICAM-1熒光蛋白嵌合體分子基因的真核表達載體，并轉染COS-7真核細胞，通過激光掃描共聚焦顯微鏡研究這兩種分子間的相互作用。 結果：①獲得了mPTA1-hIgFc融合蛋白和針對mPTA1胞膜外區(qū)的多克隆抗體，該抗體能與轉染細胞表面mP... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PATI和LAF一1復合物形成動態(tài)變化模式圖

mPATI一Fc融合蛋白及mPATI胞膜外區(qū)的SDS一APGE電泳分析

間接EUSA法檢測免疫兔血清抗mPATI的效價F191一2Thetiltersofrabbitnati·mPATIsearidentifiedbyindireetELISA


本文編號：3083565