在所有的真核生物中，人們對釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）分子遺傳學(xué)方面的認(rèn)識最早，最先完成的真核生物基因組序列測定也是釀酒酵母的基因組序列。接下來的工作就是闡明酵母的基因表達(dá)模式及其基因產(chǎn)物的功能，為了使這項(xiàng)工作進(jìn)行得更加順利，必須尋找一種既系統(tǒng)又全面的方法，來解釋酵母細(xì)胞中基因表達(dá)的模式和產(chǎn)物的功能以及產(chǎn)物之間的相互作用。 本研究利用RD—PCR（Restriction Display-PCR，RD—PCR）技術(shù)，從酵母細(xì)胞中分離出大量cDNA片段，克隆和構(gòu)建了cDNA片段文庫，進(jìn)一步將單基因片段純化出來，建立了相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫對所有信息進(jìn)行管理。經(jīng)純化的cDNA片段作為基因芯片的探針。采用Cartesian基因芯片打印儀，將純化的cDNA片段打印在CORNING玻片表面，制作了酵母細(xì)胞基因表達(dá)譜芯片。最后提取熱休克前后酵母細(xì)胞的總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄標(biāo)記合成cDNA后與酵母基因表達(dá)譜芯片雜交，初步研究了酵母細(xì)胞在熱應(yīng)激時(shí)基因表達(dá)的變化。 綜上所述，本研究采用RD—PCR技術(shù)，探索了利用該技術(shù)快速分離大量cDNA片段的具體過程，并建立了酵母cDNA文... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

由圖可以看出cDNA質(zhì)量很好，成彗星狀(smear)，可以進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。2M


本文編號：3083236