發(fā)布時間：2021-02-28 01:26

　　目的分析結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）Rv2673基因過表達對分枝桿菌細胞壁組分的影響。方法構(gòu)建Rv2673在恥垢分枝桿菌（Mycobacterium smegmatis,Msm）中的表達載體,導入到Msm后提取膜蛋白,以抗組胺酸標簽的單克隆抗體鑒定表達的Rv2673蛋白。細菌培養(yǎng)時加入¹⁴C-葡萄糖,收獲Msm后分別以氯仿∶甲醇（2∶1）、氯仿∶甲醇∶水（10∶10∶3）、ε-soak-lovolunnee試劑分步提取全細胞的細胞壁組分,其余的沉淀則用以提取LAM。以HP-TLC及SDS-PAGE方法分離提取的組分,放射自顯影。結(jié)果生物信息學分析表明Rv2673蛋白為在羧基末端具有8次跨膜結(jié)構(gòu)的膜蛋白;Western bloting方法檢測到過表達Rv2673的菌株膜蛋白中具有表達的Rv2673蛋白。TLC方法對細胞壁組分的分步分析表明過表達Rv2673的菌株及其對照菌株間DPA、DPM、Ac2PIM2、AcPIM2和Ac2PIM4/AcPIM4等小分子脂溶性分子沒有顯著性差異,但Western blot分析的細胞壁... 

【文章來源】：中國病原生物學雜志. 2019,14(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 結(jié)核分枝桿菌
        2.2 膜蛋白提取
        2.3 Western blot分析
        2.4 含有pVV2-Rv2673表達載體的Msm細胞壁組分的提取
        2.5 統(tǒng)計學方法
結(jié) 果
    1 Rv2673蛋白預測
    2 Rv2673膜蛋白在Msm中的表達
    3 高表達Rv2673的Msm細胞壁組分的差異性
討 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]細粒棘球絳蟲EgM123重組恥垢分枝桿菌疫苗在小鼠體內(nèi)的表達及其免疫應答[J]. 何黎,齊文靜,鄭雪婷,郭剛,李軍,張文寶.  中國病原生物學雜志. 2018(12)
[2]分枝桿菌細胞壁聚阿拉伯甘露糖脂的結(jié)構(gòu)、合成過程及免疫調(diào)節(jié)[J]. 李雅瓊,張文利,董旭.  中華微生物學和免疫學雜志. 2010 (09)



本文編號：3055100