目的 T1DM是一種自身免疫性疾病，現(xiàn)在的治療手段主要是注射外源胰島素或胰腺（胰島）移植來維持正常的血糖水平。但是這兩種方法均存在不可避免的缺點(diǎn)。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因技術(shù)在克服了技術(shù)問題，道德倫理問題和調(diào)控機(jī)制的人工操作問題后，將成為T1DM治療的最佳選擇。T1DM的轉(zhuǎn)基因治療目前仍處于試驗(yàn)階段，其基本過程分以下六個(gè)步驟：（1）人胰島素原基因的獲��；（2）連接調(diào)控元件并與載體連接；（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)入包裝細(xì)胞；（4）篩選出含重組DNA分子的受體細(xì)胞克��；（5）克隆基因的表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)與分離純化；（6）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)在重組質(zhì)粒已經(jīng)構(gòu)建成功的基礎(chǔ)上，主要進(jìn)行第（3）、（4）步操作，即將含人胰島素原基因（其上游連接有兩個(gè)調(diào)控元件：LPK基因啟動(dòng)子中的GIBE和IC-FBP-1基因啟動(dòng)子）的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入PA317包裝細(xì)胞系，并采用NIH3T3細(xì)胞測(cè)定病毒滴度，篩選出一株高效特異的產(chǎn)病毒細(xì)胞克隆，為下一步的細(xì)胞水平和動(dòng)物水平實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。從而為同類試驗(yàn)探索出一條成熟的技術(shù)路線。 方法 本試驗(yàn)根據(jù)前試驗(yàn)所采用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體P^LXSN... 

【文章來源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：35 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文縮略語
四、 論文主體
    1 前言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果（附表附圖）
    4 討論
    5 結(jié)論
五、 本研究新見解
六、 參考文獻(xiàn)
七、 致謝
八、 綜述
九、 個(gè)人簡(jiǎn)介
十、 在學(xué)期間發(fā)表論文、獲獎(jiǎng)等題目



本文編號(hào)：3052649