5-aza體外誘導人骨髓干細胞為心肌樣細胞研究
發(fā)布時間:2021-01-23 04:15
一般認為心肌細胞為終末分化細胞,故心肌梗死(心梗)后患者的冠狀動脈閉塞,心肌細胞發(fā)生壞死,形成斑痕結構,引發(fā)梗死區(qū)心室壁變薄,心室重構,最終引發(fā)心力衰竭及心源性卒死。近來,將體外純化,培養(yǎng)的心肌細胞或非心肌細胞移植到受損的心肌中,來代替壞死的心肌組織,稱為細胞心肌成形術(cellularcardiomyoplasty ,CCM),目前骨髓干細胞移植治療心肌梗死已成為研究熱點。目的:探討應用5-aza(5-氮胞苷)誘導體外培養(yǎng)人骨髓干細胞向心肌細胞分化作用,為臨床干細胞移植提供初步實驗依據(jù)。方法:本文通過采取正常志愿者髂后上棘穿刺點獲得骨髓干細胞,于10%人血清的培養(yǎng)基的L-DMEM,37℃,5%CO2的孵育箱中培養(yǎng),傳3代后,分為誘導組及對照組,誘導組細胞應用5×10-6mmol/L5-aza(Sigma公司),誘導20小時后繼續(xù)原10%人血清的培養(yǎng)基的L-DMEM,于37℃,5%CO2的孵育箱中培養(yǎng),對照原液及原培養(yǎng)條件培養(yǎng),不加任何干擾因素,定時換液,傳代,相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)并照相記錄。誘導組細胞行人a-action Trophonin T免疫組化染色。并進一步行RT-PCR...
【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:31 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
見大量初接種細胞:骨髓干細胞及紅細胞,為圓形或橢圓型,以圓形為主,大小不一,無法分辨細胞核(100倍普通光鏡)
24小時后細胞換液時,發(fā)現(xiàn)紅細胞脫漏,部分細胞貼于瓶底,
3:第 5 天時細胞開始傳代,傳代后細胞生長迅速,角型,長菱型(400 倍倒置顯微鏡)100 倍普通光鏡(綠色濾光鏡)圖 4:傳代后細胞生長迅速,逐漸變長,細胞呈同心(200 倍普通綠色濾光鏡)
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胚胎干細胞及其心肌細胞定向分化研究進展[J]. 康新勤,臧偉進,宋土生,臧益民. 心臟雜志. 2003(02)
[2]干細胞移植與心血管疾病[J]. 張航向,李源,臧益民. 心臟雜志. 2002(06)
本文編號:2994528
【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:31 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
見大量初接種細胞:骨髓干細胞及紅細胞,為圓形或橢圓型,以圓形為主,大小不一,無法分辨細胞核(100倍普通光鏡)
24小時后細胞換液時,發(fā)現(xiàn)紅細胞脫漏,部分細胞貼于瓶底,
3:第 5 天時細胞開始傳代,傳代后細胞生長迅速,角型,長菱型(400 倍倒置顯微鏡)100 倍普通光鏡(綠色濾光鏡)圖 4:傳代后細胞生長迅速,逐漸變長,細胞呈同心(200 倍普通綠色濾光鏡)
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胚胎干細胞及其心肌細胞定向分化研究進展[J]. 康新勤,臧偉進,宋土生,臧益民. 心臟雜志. 2003(02)
[2]干細胞移植與心血管疾病[J]. 張航向,李源,臧益民. 心臟雜志. 2002(06)
本文編號:2994528
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