5-aza體外誘導(dǎo)人骨髓干細(xì)胞為心肌樣細(xì)胞研究
發(fā)布時間:2021-01-23 04:15
一般認(rèn)為心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,故心肌梗死(心梗)后患者的冠狀動脈閉塞,心肌細(xì)胞發(fā)生壞死,形成斑痕結(jié)構(gòu),引發(fā)梗死區(qū)心室壁變薄,心室重構(gòu),最終引發(fā)心力衰竭及心源性卒死。近來,將體外純化,培養(yǎng)的心肌細(xì)胞或非心肌細(xì)胞移植到受損的心肌中,來代替壞死的心肌組織,稱為細(xì)胞心肌成形術(shù)(cellularcardiomyoplasty ,CCM),目前骨髓干細(xì)胞移植治療心肌梗死已成為研究熱點(diǎn)。目的:探討應(yīng)用5-aza(5-氮胞苷)誘導(dǎo)體外培養(yǎng)人骨髓干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化作用,為臨床干細(xì)胞移植提供初步實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:本文通過采取正常志愿者髂后上棘穿刺點(diǎn)獲得骨髓干細(xì)胞,于10%人血清的培養(yǎng)基的L-DMEM,37℃,5%CO2的孵育箱中培養(yǎng),傳3代后,分為誘導(dǎo)組及對照組,誘導(dǎo)組細(xì)胞應(yīng)用5×10-6mmol/L5-aza(Sigma公司),誘導(dǎo)20小時后繼續(xù)原10%人血清的培養(yǎng)基的L-DMEM,于37℃,5%CO2的孵育箱中培養(yǎng),對照原液及原培養(yǎng)條件培養(yǎng),不加任何干擾因素,定時換液,傳代,相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)并照相記錄。誘導(dǎo)組細(xì)胞行人a-action Trophonin T免疫組化染色。并進(jìn)一步行RT-PCR...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:31 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
見大量初接種細(xì)胞:骨髓干細(xì)胞及紅細(xì)胞,為圓形或橢圓型,以圓形為主,大小不一,無法分辨細(xì)胞核(100倍普通光鏡)
24小時后細(xì)胞換液時,發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞脫漏,部分細(xì)胞貼于瓶底,
3:第 5 天時細(xì)胞開始傳代,傳代后細(xì)胞生長迅速,角型,長菱型(400 倍倒置顯微鏡)100 倍普通光鏡(綠色濾光鏡)圖 4:傳代后細(xì)胞生長迅速,逐漸變長,細(xì)胞呈同心(200 倍普通綠色濾光鏡)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胚胎干細(xì)胞及其心肌細(xì)胞定向分化研究進(jìn)展[J]. 康新勤,臧偉進(jìn),宋土生,臧益民. 心臟雜志. 2003(02)
[2]干細(xì)胞移植與心血管疾病[J]. 張航向,李源,臧益民. 心臟雜志. 2002(06)
本文編號:2994528
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:31 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
見大量初接種細(xì)胞:骨髓干細(xì)胞及紅細(xì)胞,為圓形或橢圓型,以圓形為主,大小不一,無法分辨細(xì)胞核(100倍普通光鏡)
24小時后細(xì)胞換液時,發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞脫漏,部分細(xì)胞貼于瓶底,
3:第 5 天時細(xì)胞開始傳代,傳代后細(xì)胞生長迅速,角型,長菱型(400 倍倒置顯微鏡)100 倍普通光鏡(綠色濾光鏡)圖 4:傳代后細(xì)胞生長迅速,逐漸變長,細(xì)胞呈同心(200 倍普通綠色濾光鏡)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胚胎干細(xì)胞及其心肌細(xì)胞定向分化研究進(jìn)展[J]. 康新勤,臧偉進(jìn),宋土生,臧益民. 心臟雜志. 2003(02)
[2]干細(xì)胞移植與心血管疾病[J]. 張航向,李源,臧益民. 心臟雜志. 2002(06)
本文編號:2994528
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