目的探究敲減鈣離子/鈣調(diào)蛋白依賴性激酶Ⅳ（Ca MKⅣ）基因?qū)ρ仔耘囵B(yǎng)條件下C2C12細(xì)胞免疫分子表達(dá)的影響。方法采用慢病毒基因干擾技術(shù)敲減C2C12細(xì)胞的Ca MKⅣ基因,以2%馬血清將C2C12細(xì)胞分化成肌管,以干擾素-γ（IFN-γ）刺激C2C12細(xì)胞,采用Real-time PCR和Western blotting檢測Ca MKⅣ的表達(dá),采用Western blotting和免疫熒光檢測免疫分子主要組織相容性復(fù)合體（MHC） classⅠ（H-2Kb）、MHC classⅡ（H2-Ea）、Toll樣受體3（TLR3）的表達(dá),采用Real-time檢測肌細(xì)胞分泌型促炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-6、腫瘤壞死因子（TNF）-α、巨噬細(xì)胞炎性蛋白（MIP）-1α和單核細(xì)胞趨化因子（MCP）-1的基因表達(dá)。結(jié)果 IFN-γ可誘導(dǎo)成肌干細(xì)胞以及分化肌管表達(dá)或上調(diào)表達(dá)免疫分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、TLR3,同時(shí)上調(diào)C2C12細(xì)胞促炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MIP-1α和MCP-1的基因表達(dá)量;敲減Ca MKⅣ基因?qū)е律鲜錾险{(diào)趨勢被抑制。結(jié)論敲減Ca MK... 

【文章來源】：解剖學(xué)報(bào). 2019,50(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1.主要試劑
    2.細(xì)胞系
    3.細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、分化和處理
    4.Real-time PCR檢測CaMKⅣ和細(xì)胞因子基因表達(dá)水平
    5.Western blotting檢測CaMKⅣ、MHC分子及TLR3表達(dá)
    6.免疫熒光檢測MHC分子及TLR3表達(dá)
    7.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1.CaMKⅣshRNA抑制C2C12細(xì)胞CaMKⅣ的表達(dá)
    2.敲減C2C12細(xì)胞內(nèi)的CaMKⅣ基因可抑制IFN-γ誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)/表達(dá)的炎癥分子H-2kb、H2-Ea和TLR3
    3.敲減C2C12細(xì)胞內(nèi)的Ca MKⅣ基因可抑制IFN-γ誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)/表達(dá)的促炎性細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)
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