目的：對(duì)廣西、貴州的4株伯氏疏螺旋體分離株進(jìn)行基因種鑒定，進(jìn)而克隆其外膜蛋白A（OSPA），測(cè)序分析其變異情況，體外表達(dá)OSPA基因，獲取OSPA蛋白，為制備診斷試劑和疫苗研究作基礎(chǔ)準(zhǔn)備。方法：利用5s-23srRNA（rrf-rrl）基因間隔區(qū)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物插入質(zhì)粒pGEM-T Easy中，構(gòu)建重組質(zhì)粒，經(jīng)測(cè)序并與國(guó)外分離株進(jìn)行同源性比較，鑒定4株伯氏疏螺旋體（GXLD-4、9、18和長(zhǎng)14）的基因型。應(yīng)用PCR技術(shù)、分子克隆、原核表達(dá)等方法從4株伯氏疏螺旋體全細(xì)胞DNA組中擴(kuò)增得到OSPA基因，分別克隆到質(zhì)粒pGEM-T Easy上，對(duì)陽(yáng)性克隆進(jìn)行測(cè)序和序列分析，與國(guó)外分離株進(jìn)行同源性比較，并用限制性內(nèi)切酶NdeI和XhoI從重組質(zhì)粒pGEM-T Easy-OSPA上將OSPA基因切下，分別克隆到表達(dá)載體pET3oa中，在大腸桿菌BL₂1中進(jìn)行表達(dá)。結(jié)果：GXLD-4、9、18及長(zhǎng)14株（貴州）均可擴(kuò)增出242bp的5s-23srRNA間隔區(qū)基因，同源性達(dá)99％以上。與Borrelia valaisiana基因種的同源性均比其他基因種高，核苷酸同源... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一、 英文縮寫(xiě)
二、 摘要
    1 中文摘要
    2 英文摘要
三、 論文
    第一部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    第二部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
四、 綜述
五、 致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2959296