目的：對廣西、貴州的4株伯氏疏螺旋體分離株進行基因種鑒定，進而克隆其外膜蛋白A（OSPA），測序分析其變異情況，體外表達OSPA基因，獲取OSPA蛋白，為制備診斷試劑和疫苗研究作基礎準備。方法：利用5s-23srRNA（rrf-rrl）基因間隔區(qū)引物進行PCR擴增，其產物插入質粒pGEM-T Easy中，構建重組質粒，經測序并與國外分離株進行同源性比較，鑒定4株伯氏疏螺旋體（GXLD-4、9、18和長14）的基因型。應用PCR技術、分子克隆、原核表達等方法從4株伯氏疏螺旋體全細胞DNA組中擴增得到OSPA基因，分別克隆到質粒pGEM-T Easy上，對陽性克隆進行測序和序列分析，與國外分離株進行同源性比較，并用限制性內切酶NdeI和XhoI從重組質粒pGEM-T Easy-OSPA上將OSPA基因切下，分別克隆到表達載體pET3oa中，在大腸桿菌BL₂1中進行表達。結果：GXLD-4、9、18及長14株（貴州）均可擴增出242bp的5s-23srRNA間隔區(qū)基因，同源性達99％以上。與Borrelia valaisiana基因種的同源性均比其他基因種高，核苷酸同源... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
一、 英文縮寫
二、 摘要
    1 中文摘要
    2 英文摘要
三、 論文
    第一部分
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
    第二部分
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
四、 綜述
五、 致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2959296