鐮刀菌素C（FC）是從串珠鐮刀菌培養(yǎng)提取物中分離到的一種致突，致癌的真菌毒素。串珠鐮刀菌廣泛存在于各種植物宿主中，并已查明這種霉菌是食管癌高發(fā)區(qū)玉米中的優(yōu)勢菌之一。給大鼠灌喂3H-FC后，小腸，前胃和肝放射性最高。腎、膀胱和食管次之，脾最低。血中放射性在給³H-FC后3小時達高峰。給予³H-FC后48小時內尿和糞便累積排出放射性占給予量的58.5％。³H-FC在大鼠體內有94.6％代謝轉化成其他代謝產物。在體外大鼠食管組織培養(yǎng)中。³H-FC能與其DNA共價結合。但FC不能誘導大鼠食管上皮（REE）細胞非程序DNA合成增高。FC處理的REE細胞表現(xiàn)出以下惡性轉化特征，能在無血清，無EGF的選擇培養(yǎng)基中繼續(xù)生長并能在半固體瓊脂上形成集落；染色體核型已發(fā)生變化，數(shù)目增多，結構畸變；N-ras、C-myc和V-erb-B三種癌基因mRNA表達水平增高；失去了對TPA調常C-myc基因表達的反應；但未能在裸鼠體內形成腫瘤。這些結果表明這種細胞已處于癌前（Pre-neoplastic）階段。 此外，原位雜... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
論文題目
中文摘要
英文摘要
本文所用縮寫
第一章 緒論
    一、串珠鐮刀菌培養(yǎng)粗提物致突變和致癌作用研究概況
    二、FC致突變,致癌作用研究概況
    三、化學致癌過程中的細胞和分子變化
第二章 材料與方法
    一、串珠鐮刀菌培養(yǎng)及FC提取
    二、3H—FC在大鼠體內的代謝
    三、3H—FC與大鼠食管DNA結合
    四、正常大鼠食管上皮細胞培養(yǎng)
        1.培養(yǎng)基和溶液
        2.基質
        3.原代細胞培養(yǎng)
        4.傳代細胞培養(yǎng)
        5.培養(yǎng)細胞鑒定
    五、REE細胞的轉化
        1.致癌物
        2.細胞
        3.致癌物處理及S9混合物配制
        4.轉化細胞的早期初步篩選
        5.半固體瓊脂生長和裸鼠致癌試驗
        6.染色體制備
    六、UDS試驗
    七、ras,myc和erb-B三種癌基因探針的原位雜交
        1.缺口翻譯標記探針
        2.雜交液及雜交用溶液
        3.致癌物或促癌物處理細胞
        4.雜交前處理及雜交
        5.涂乳膠、暴光、顯影和定影
        6.細胞銀顆粒計數(shù)
第三章 結果
    一、3H—FC在大鼠體內的代謝
        1.3H—FC在大鼠組織中的分布
        2.血中放射性濃度—時間曲線
        3.3H—FC經尿和糞便的排泄
        4.尿中代謝產物的初步鑒定
    二、3H—FC在體外與大鼠食管DNA結合
    三、正常大鼠食管上皮細胞培養(yǎng)
        1.上皮細胞系
        2.細胞系特性
    四、FC對REE細胞的惡性轉化作用
        1.轉化細胞形態(tài)和生長特性
        2.相對存活率
        3.轉化頻率
        4.半固體瓊脂集落形成率
        5.轉化細胞染色體核型改變
        6.轉化細胞的異體接種
ZA對REE細胞的轉化作用">    五、NMB_ZA對REE細胞的轉化作用
ZA轉化作用的影響">    六、S9混合物對FC和NMB_ZA轉化作用的影響
ZA誘導REE細胞UDS">    七、FC和NMB_ZA誘導REE細胞UDS
    八、N—ras,C—myc和V—erb—B癌基因mRNA在REE細胞中的表達
2T三種細胞癌基因mRNA表達水平的比較">        1.RE—525,RE—FC和B₂T三種細胞癌基因mRNA表達水平的比較
ZA對RF—525三種癌基因mRNA表達的影響">        2.FC和NMB_ZA對RF—525三種癌基因mRNA表達的影響
2細胞C—myc mRNA表達的影響">        3.TPA對RE—525,RE—FC和B₂細胞C—myc mRNA表達的影響
第四章 討論
    一、FC在大鼠體內的代謝
    二、FC與大鼠食管DNA結合
    三、正常大鼠食管上皮細胞培養(yǎng)及惡性轉化
ZA誘導REE細胞UDS">    四、FC和NMB_ZA誘導REE細胞UDS
    五、用原位雜交技術研究癌基因表達
第五章 結論
表格
致謝
參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2950182