基因工程產(chǎn)品的生產(chǎn)是一項(xiàng)十分復(fù)雜的系統(tǒng)工程，可分為上游和下游兩個(gè)階段，以分離目的基因、構(gòu)建工程菌為主要內(nèi)容的上游工藝是研制基因工程產(chǎn)品必不可少的基礎(chǔ)，而作為下游工藝核心內(nèi)容的工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)、目的蛋白的分離純化卻直接控制著整個(gè)基因工程產(chǎn)品的質(zhì)量、產(chǎn)量。本課題利用基因工程技術(shù)，重點(diǎn)從基因工程下游階段著手研究，利用最新現(xiàn)代生物技術(shù)研究并建立經(jīng)優(yōu)化的高密度發(fā)酵工藝模式及高效分離純化包涵體重組蛋白模式。 一．研究并建立一種適于目的蛋白高效表達(dá)的高密度發(fā)酵工藝模式 高密度發(fā)酵中，人們最關(guān)心的問題主要是質(zhì)粒穩(wěn)定性的維持、外源基因的高效表達(dá)及對(duì)下游純化的影響。針對(duì)這些問題，我們采用分批補(bǔ)料培養(yǎng)的方法優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基配方及部分發(fā)酵條件，探索出即適于外源基因高效表達(dá)，又利于產(chǎn)品純化的發(fā)酵工藝。以我室構(gòu)建并穩(wěn)定表達(dá)的重組質(zhì)粒pBV220-γ-IFN、pBV220-HGFα、pBV220-HGFβ、pBV220-hPK5為模型，分別從不同的表達(dá)宿主菌中篩選出一種適合大規(guī)模生產(chǎn)的菌種BL21（DE3），該工程菌株連續(xù)傳代100代表達(dá)質(zhì)粒不丟失，表達(dá)量穩(wěn)定；采用B.Braun公司的BIOSTAT-C1... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 基因工程菌高密度發(fā)酵工藝的研究
    前言
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 包涵體重組蛋白純化工藝的研究
    前言
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]從包涵體中純化重組人幽門螺桿菌尿素酶B亞單位[J]. 王縛鯤,鄒全明,張衛(wèi)軍,田文標(biāo),朱永紅,楊珺,毛旭虎.  中國生物制品學(xué)雜志. 2002(01)
[2]重組人干擾素α2b包涵體純化方法的研究[J]. 楊欣,曾獻(xiàn)武,嚴(yán)君喜,王艷.  中國生化藥物雜志. 2001(06)
[3]包涵體蛋白體外復(fù)性的研究進(jìn)展[J]. 方敏,黃華樑.  生物工程學(xué)報(bào). 2001(06)
[4]包含體蛋白質(zhì)的復(fù)性研究進(jìn)展[J]. 寧云山,李妍,王小寧.  生物技術(shù)通訊. 2001(03)
[5]精制地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗純化工藝的建立[J]. 呂宏亮,宋繼萍,鄒勇,王玉琳,周書全.  生物技術(shù)通訊. 2001(03)
[6]重組包涵體蛋白質(zhì)的折疊復(fù)性[J]. 馮小黎.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2001(04)
[7]新型重組人腫瘤壞死因子工程菌的發(fā)酵工藝研究[J]. 顏真,張英起,李民,陳常慶.  中國生化藥物雜志. 2001(02)
[8]分泌型重組人生長激素工程菌的高密度發(fā)酵[J]. 李武平,王志武,朱麗娜,張雪梅,劉麗軍,劉柱,盛君,郝淑美,孫宏,向澤敏.  中國生物制品學(xué)雜志. 2000(03)
[9]人白細(xì)胞介素18在大腸桿菌中的表達(dá)、純化和復(fù)性[J]. 裴冬生,胡書群,趙惠仁.  生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào). 2000(04)
[10]重組人肝增強(qiáng)因子工程菌JM109的發(fā)酵工藝研究[J]. 李茹冰,單中元,付泳航,楊聯(lián)萍,易學(xué)瑞,孔祥平.  中國生化藥物雜志. 2000(02)



本文編號(hào)：2949732