C57小鼠下腔靜脈狹窄法DVT模型的建立及PAR1、VCAM-1與深靜脈血栓形成的相關(guān)性研究
本文關(guān)鍵詞:C57小鼠下腔靜脈狹窄法DVT模型的建立及PAR1、VCAM-1與深靜脈血栓形成的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:1.下腔靜脈狹窄法建立C57小鼠DVT模型,比較不同狹窄程度對血栓形成的影響2.C57小鼠造模后24小時(shí)取材下腔靜脈及血栓組織,HE染色觀察血栓形成,RT-PCR檢測靜脈壁組織中PAR1、VCAM-1的表達(dá)材料與方法1.C57小鼠60只,隨機(jī)數(shù)字編號并分為兩組:造模A組30只(29G型號針頭,直徑=0.33mm);造模B組30只(30G型號針頭,直徑=0.3mm)。兩組分別采用29G和30G胰島素針頭進(jìn)行小鼠下腔靜脈狹窄法瘀滯造模。造模過程中分別測量記錄兩組小鼠體重及下腔靜脈直徑,下腔靜脈直徑(標(biāo)記為D),半徑則為D/2(標(biāo)記為R),然后計(jì)算出C57小鼠下腔靜脈原始管腔血流橫截面積(標(biāo)記為A,A=πR2);再根據(jù)兩組針頭不同直徑(標(biāo)記為d),針頭半徑為d/2(標(biāo)記為r),算出造模后殘余管腔橫截面積(標(biāo)記為B,B=πr2)。則造模后殘余管腔面積比=造模后管腔橫截面積/原始管腔橫截面積=B/A*100%;狹窄率=(A-B)/A*100%。設(shè)定術(shù)后24小時(shí)為時(shí)間點(diǎn)(既小鼠DVT形成急性期),觀察記錄相同時(shí)間狀態(tài)下兩組模型死亡情況及肉眼觀察成栓情況,并獲取血栓長度及重量。結(jié)合以上數(shù)據(jù)分析比較兩種不同狹窄率在下腔靜脈狹窄法瘀滯模型中血栓形成的穩(wěn)定情況。2.120只C57小鼠隨機(jī)分為3組:正常對照組40只、假手術(shù)組40只、下腔靜脈狹窄組40只。正常組正常喂養(yǎng),假手術(shù)組暴露下腔靜脈后關(guān)腹,模型組通過上一部分選出成栓穩(wěn)定的狹窄率針頭進(jìn)行下腔靜脈狹窄法造模。造模后24小時(shí)獲取的血栓及靜脈壁組織切片及HE染色,光鏡下觀察不同倍數(shù)所取材微觀情況;正常組和假手術(shù)組同樣24小時(shí)取材下腔靜脈進(jìn)行組織切片及HE染色,光鏡下與下腔靜脈狹窄組進(jìn)行對比。采用real-time PCR法,測量并比較各組間C57小鼠靜脈壁組織中PAR1及VCAM-1的表達(dá)變化。結(jié)果1.造模A組(29G型號針頭,直徑=0.33mm)死亡率為6.67%,造模B組(30G型號針頭,直徑=0.3mm)死亡率為3.33%,兩組間死亡情況不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(p0.05),29G造模組成栓率為60.71%,30G造模組成栓率為86.67%,兩組之間的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(p0.05)。29G造模組狹窄率為:88.82%,殘余管腔橫截面積比為11.18%;30G造模組狹窄率為90.67%,殘余管腔橫截面積比為9.33%;兩組間狹窄率和參與后管腔橫截面積比都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05)血栓重量在兩個(gè)模型組中的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(p0.05),血栓長度在兩個(gè)模型組中的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(p0.05),C57小鼠體重和下腔靜脈直徑之間呈正相關(guān)。2.C57小鼠下腔靜脈狹窄法造模后24小時(shí),雙側(cè)后肢青紫、腫脹,且活動明顯受限;開腹后觀察造模段下腔靜脈管腔內(nèi)出現(xiàn)黑色凝塊物質(zhì);下腔靜脈脹大明顯;光鏡下見:血栓充滿整個(gè)管腔,血栓與大部分靜脈壁粘連。靜脈壁炎性細(xì)胞侵潤,未現(xiàn)機(jī)化現(xiàn)象。正常組及假手術(shù)組HE染色可見靜脈壁光滑,管腔無血栓形成。3.PAR1、VCAM-1在C57小鼠下腔靜脈狹窄DVT模型靜脈壁中的表達(dá)升高,且較正常對照組和假手術(shù)組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),正常組及假手術(shù)組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論1.下腔靜脈狹窄法可成功建立C57小鼠DVT模型2.PAR1、VCAM-1可能與深靜脈血栓形成相關(guān)
【關(guān)鍵詞】:DVT 動物模型下腔靜脈 PAR1 VCAM-1
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R-332;R543.6
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-10
- 前言10-16
- 第一部分 下腔靜脈狹窄法建立小鼠DVT模型及不同狹窄程度比較血栓形成情況16-31
- 材料和方法16-24
- 結(jié)果24-31
- 第二部分 C57小鼠DVT模型靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中PAR1、VCAM-1的表達(dá)變化31-47
- 材料和方法31-41
- 結(jié)果41-47
- 討論47-55
- 結(jié)論55-56
- 參考文獻(xiàn)56-59
- 文獻(xiàn)綜述59-63
- 參考文獻(xiàn)62-63
- 在讀期間基本情況63-64
- 致謝64
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本文關(guān)鍵詞:C57小鼠下腔靜脈狹窄法DVT模型的建立及PAR1、VCAM-1與深靜脈血栓形成的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:294409
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