目的:探討過表達Homer1a對神經(jīng)元機械性損傷模型細胞凋亡和AMP活化蛋白激酶（AMPK）表達的影響。方法:分離培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元,隨機分組為對照組、模型組、空載組和Homer1a過表達（Exp-Homer1a）組。構(gòu)建神經(jīng)元機械性損傷模型,轉(zhuǎn)染Homer1a過表達載體。采用MTT法檢測各組細胞活力,qPCR檢測各組細胞Homer1a的mRNA表達水平,使用乳酸脫氫酶（LDH）測試盒測定各組細胞上清液LDH活性,流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡水平,Western blot檢測各組Hormer1a、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-AMPKα和AMPKα蛋白的表達。結(jié)果:與對照組比較,機械性損傷神經(jīng)元的活力顯著降低,上清液LDH活性和神經(jīng)元凋亡率顯著增加（P<0.05）,且Homer1a mRNA和蛋白表達水平顯著升高（P<0.05）;與模型組比較,Exp-Homer1a組的上清液LDH活性和神經(jīng)元凋亡率顯著降低,神經(jīng)元中cleaved caspase-3和Bax的表達水平顯著降低（P<0.05）,Bcl-2和p-AMPKα的表達水平顯著升高... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2019年06期 北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 實驗材料與試劑
    2 方法
        2.1 大鼠腦皮層神經(jīng)元的分離培養(yǎng)
        2.2 離體神經(jīng)元機械性損傷模型的建立
        2.3 實驗分組
        2.4 qPCR檢測Hormer1a mRNA表達水平
        2.5 MTT檢測細胞增殖活性
        2.6 LDH活性檢測
        2.7 流式細胞術(shù)檢測凋亡
        2.8 Western blot檢測Hormer1a、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2和p-AMPK蛋白表達
    3 統(tǒng)計學處理
結(jié) 果
    1 各組神經(jīng)元Homer1a表達
    2 過表達Homer1a可提高機械性損傷神經(jīng)元的活力
    3 過表達Homer1a可降低機械性損傷神經(jīng)元上清液的LDH活性
    4 過表達Homer1a可降低機械性損傷神經(jīng)元的凋亡率
    5 過表達Homer1a可促進機械性損傷神經(jīng)元中AMPKα蛋白的表達
討 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]顱腦損傷患者Homer1a蛋白表達及其與神經(jīng)元損傷、凋亡的關(guān)系研究[J]. 黃從剛,段發(fā)亮,吳京雷,黃喬春,閔強,羅明,陳謙學,王遠,宋平,李繼強.  中華神經(jīng)醫(yī)學雜志. 2017 (06)
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[5]重型彌漫性顱腦損傷大鼠海馬區(qū)Homer1a表達與神經(jīng)細胞丟失的關(guān)系[J]. 李建民,趙雅寧,馬榮麗,竇娜,陳長香,李淑杏,張盼.  醫(yī)學研究生學報. 2014(08)
[6]神經(jīng)干細胞移植在創(chuàng)傷性腦損傷再生與修復中的作用和影響因素[J]. 賀曉生.  中華神經(jīng)外科疾病研究雜志. 2012(01)



本文編號：2941794