目的探討多囊卵巢綜合征（PCOS）易感基因dennd1a在斑馬魚(yú)模型胚胎發(fā)育過(guò)程以及成魚(yú)不同器官中的表達(dá),構(gòu)建適用于PCOS分子機(jī)制研究的斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。方法采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）及實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）技術(shù),檢測(cè)dennd1a基因在斑馬魚(yú)中的表達(dá)特性。利用胚胎整體原位雜交（WISH）方法,觀察dennd1a基因在斑馬魚(yú)胚胎內(nèi)的表達(dá)及分布。結(jié)果 qRT-PCR結(jié)果顯示斑馬魚(yú)dennd1a mRNA的表達(dá)水平隨著胚胎的發(fā)育而增加,且在多個(gè)組織中均有表達(dá),于神經(jīng)系統(tǒng)和雄性生殖系統(tǒng)中存在高表達(dá)。WISH結(jié)果表明該基因早期主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)。結(jié)論斑馬魚(yú)dennd1a基因的表達(dá)在胚胎早期發(fā)育中發(fā)揮重要作用,基因高表達(dá)尤其發(fā)現(xiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和雄性生殖系統(tǒng),提示該基因的表達(dá)可能通過(guò)影響神經(jīng)內(nèi)分泌功能,調(diào)控雄激素的合成或釋放,誘發(fā)PCOS并導(dǎo)致相關(guān)表型。 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019年01期 北大核心

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雌性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定性表達(dá)Fig．3Qualitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansoffemalezebrafish

、骨髓、腎臟不同器官中廣泛表達(dá)。定量結(jié)果顯示，dennd1a的表達(dá)在腦、眼、骨髓以及肝臟和鰭中表達(dá)水平較高，而在肌肉、脾、腎、鰓、卵巢、腸中表達(dá)水平較低。在雌魚(yú)中，dennd1a在腦中的表達(dá)是在腸的(12．06±1．55)倍(P＜0．01);而在雄魚(yú)中，dennd1a在腦的表達(dá)是腸的(20．52±1．57)倍(P＜0．01)。圖3雌性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定性表達(dá)Fig．3Qualitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansoffemalezebrafish圖4雌性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定量表達(dá)Fig．4Quantitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansoffemalezebrafish2．2成體動(dòng)物卵巢與精巢中dennd1amＲNA的定量表達(dá)見(jiàn)圖7。dennd1a在成年雄魚(yú)精巢的表達(dá)量是雌魚(yú)卵巢表達(dá)量的(3．34±0．44)倍(P＜0．01)。2．3斑馬魚(yú)胚胎整體原位雜交2．3．1斑馬魚(yú)1日齡胚胎整體原位雜交見(jiàn)圖8。dennd1a主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)，包括端腦頂蓋、后腦、松果體、側(cè)后結(jié)節(jié)以及視網(wǎng)膜。在松果體和視網(wǎng)膜，dennd1a的表達(dá)局限于少數(shù)神經(jīng)細(xì)胞(如視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞;紫色)，而在中腦和后腦，dennd1a基因的表達(dá)則較為彌散(淺紫色;白色星號(hào))。圖5雄性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定性表達(dá)Fig．5Qualitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansofmalezebrafish圖6雄性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定量表達(dá)Fig．6Quantitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansofmalezebrafish圖7成體卵巢與精巢中dennd1amＲNA的定量表達(dá)Fig．7Quantitativeexpressionofd

alezebrafish2．2成體動(dòng)物卵巢與精巢中dennd1amＲNA的定量表達(dá)見(jiàn)圖7。dennd1a在成年雄魚(yú)精巢的表達(dá)量是雌魚(yú)卵巢表達(dá)量的(3．34±0．44)倍(P＜0．01)。2．3斑馬魚(yú)胚胎整體原位雜交2．3．1斑馬魚(yú)1日齡胚胎整體原位雜交見(jiàn)圖8。dennd1a主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)，包括端腦頂蓋、后腦、松果體、側(cè)后結(jié)節(jié)以及視網(wǎng)膜。在松果體和視網(wǎng)膜，dennd1a的表達(dá)局限于少數(shù)神經(jīng)細(xì)胞(如視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞;紫色)，而在中腦和后腦，dennd1a基因的表達(dá)則較為彌散(淺紫色;白色星號(hào))。圖5雄性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定性表達(dá)Fig．5Qualitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansofmalezebrafish圖6雄性斑馬魚(yú)的不同器官中dennd1amＲNA的定量表達(dá)Fig．6Quantitativeexpressionofdennd1amＲNAindifferentorgansofmalezebrafish圖7成體卵巢與精巢中dennd1amＲNA的定量表達(dá)Fig．7Quantitativeexpressionofdennd1amＲNAinadultze-brafishovariesandtestis

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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