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RNAi阻斷B7/CD28共刺激通路在小鼠心臟移植中的抗排斥反應作用

發(fā)布時間:2020-12-16 04:26
  本課題應用RNAi技術修飾骨髓來源樹突狀細胞,通過抑制其CD80、CD86表達以阻斷B7/CD28協(xié)同刺激通路,從中探討誘導T淋巴細胞無能的機理;研究經RNAi敲減CD80、CD86后的供體來源樹突狀細胞在異體心臟移植中對移植物的保護作用及其抗排斥機制。比較具有免疫抑制作用的青藤堿單藥與RNAi敲減DC治療在小鼠異位心臟移植中的抗排斥作用。 第一部分 小鼠異位心臟移植模型的建立 目的 建立穩(wěn)定的小鼠異位心臟移植模型。方法 采用顯微外科技術將供心升主動脈、肺動脈分別與受體腹主動脈、下腔靜脈行端側吻合。實驗中對Corry術式加以改進,即取供心時先集束結扎除升主動脈、肺動脈以外心臟所有血管再剪斷升主動脈、肺動脈;切取供心后經升主動脈直接灌注冠脈系統(tǒng);以結扎線替代血管夾阻斷受體血管,擴大血管吻合操作空間。結果 定向實驗階段手術成功率85.7%,供體手術時間5.51±1.10min,受體手術時間56.91±5.23min,其中動脈吻合16.64±1.52min,靜脈吻合8.79±1.49 min,供心缺血時間36.63±3.25 min。結論 失血性休克是受體死亡的重要原因,其中包... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數】:118 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

RNAi阻斷B7/CD28共刺激通路在小鼠心臟移植中的抗排斥反應作用


灌注后供心圖1一3供心恢復血流后

異位心臟移植模型,手術時間,小鼠,受體


圖14建立小鼠異位心臟移植模型兩階段手術時間比較(單位:分鐘)鼠異位心臟移植手術失敗原因分析:兩階段受體死亡原因來看,血管并發(fā)癥是受體死亡的主要原因,階段占63%(巧/24),即使在定向實驗階段血管并發(fā)癥也占41%(5/括動脈吻合口出血、動脈栓塞、靜脈扭曲及血栓形成:在技術訓操作尚不熟練,有5例在分離血管過程中出現大出血致死亡(5/2向實驗階段,僅有2例發(fā)生意外性大出血致受體死亡。麻醉意外等作失誤造成受體死亡例數,在兩階段差別不明顯。結果詳見表1一3

骨髓,來源,箭頭,流式細胞計


.臺盼藍拒染法檢測活力95%以上。3.瑞式染色可見大量有樹突狀突起的細胞(見圖2一2)。圖2一2小鼠骨髓來源DC(箭頭所示)4.DC表面抗原檢測:流式細胞計檢測CDlle、CD80、CD86、MHCll陽性率分別為91%、84%、67%、93%。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠腹腔心臟移植技術的改良[J]. 金鐘大,陳江華.  局解手術學雜志. 2004(03)
[2]樹突狀細胞的制備及生物學特性的研究[J]. 任穎,銀平章,孔令非,唐華.  實用診斷與治療雜志. 2004(03)
[3]應用RNA干擾技術抑制哺乳動物體內基因表達[J]. 張愛宏,劉國慶.  生理科學進展. 2004(02)
[4]從自然藥物中提取免疫抑制劑的研究進展[J]. 戴英波,黃循,羅志剛.  現代中西醫(yī)結合雜志. 2004(07)
[5]器官移植新進展[J]. 陳實.  臨床外科雜志. 2004(01)
[6]樹突狀細胞與移植免疫耐受的研究[J]. 鄭峻松,吳軍,肖光夏.  中華燒傷雜志. 2003(06)
[7]RNA干擾及其在哺乳動物基因功能研究中的應用[J]. 崔東紅.  國外醫(yī)學.遺傳學分冊. 2003(06)
[8]樹突狀細胞誘導移植免疫耐受的研究進展[J]. 鄭伏甫.  國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊. 2003(06)
[9]兩種小鼠異位心臟移植模型的復制及比較[J]. 周景師,竇科峰,孫凱,李海民,陳勇.  醫(yī)學研究生學報. 2003(09)
[10]RNA干涉[J]. 馬琳琳.  國外醫(yī)學.遺傳學分冊. 2003(04)



本文編號:2919526

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