隨著人類基因組計(jì)劃的完成和表達(dá)序列標(biāo)簽數(shù)據(jù)的積累和釋放,電子克隆逐漸成為一種常用的方法,用來迅速獲取所感興趣的基因。在過去的工作中,我們實(shí)驗(yàn)室用差異顯示方法從肝癌和癌旁組織中得到了大量的EST。為了獲取新的基因用于以后的功能研究,我們選取這些EST作為信息探針,采用EST策略和試驗(yàn)結(jié)合的方法,進(jìn)行人類新基因的研究工作。本論文分為兩個部分,第一部分利用EST策略克隆了新的人和小鼠小G蛋白基因ARHT2、RHEBL1和假激酶基因STK40。第二部分是用同源克隆策略獲得在睪丸中特異表達(dá)的新型乳酸脫氫酶基因LDHAL。 在第一部分第一章中我們用EST策略獲得了一個新的小GTP酶ARHT2基因,RHO家族小G蛋白是是Ras GTP酶超家族的一個重要分支。ARHT基因是Rho家族新近發(fā)現(xiàn)的成員。它含有兩個GTP酶結(jié)構(gòu)域,兩個EF-hand結(jié)構(gòu)域。其激活型蛋白的超量表達(dá)可以導(dǎo)致細(xì)胞凋亡率的增加。此外我們還用同源克隆策略獲得了其它物種的ARHT2基因。Northern結(jié)果顯示人ARHT2轉(zhuǎn)錄本約2.6kb,在人體內(nèi)廣譜表達(dá),在睪丸和前列腺中表達(dá)豐度很高。而小鼠Arht2也是廣譜表達(dá),也在睪丸中高... 

【文章來源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

人和小鼠ARHTZ基因染色體定位圖

圖6不同物種ARHTZ推導(dǎo)蛋白的氛基酸序列的比較分析，其中一致序列用黑色陰影顯示，相似序列用灰色陰影顯示。不同序列的登錄號為:人AAP4O69;0小鼠A八尸78906;大鼠NP一61544;牛N--P84788;6豬AAP044O;S斑馬魚AAH44431和果蠅NP732936.將這些基因編碼的蛋白序列用SMART程序分析，發(fā)現(xiàn)這七種序列均存在兩個被EF剎ANO結(jié)構(gòu)域分開的RhoGTPase結(jié)構(gòu)域，在C端有一個跨膜結(jié)構(gòu)域(圖7)。

將這些基因編碼的蛋白序列用SMART程序分析，發(fā)現(xiàn)這七種序列均存在兩個被EF剎ANO結(jié)構(gòu)域分開的RhoGTPase結(jié)構(gòu)域，在C端有一個跨膜結(jié)構(gòu)域(圖7)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]精子避孕疫苗抗原研究進(jìn)展[J]. 宋濟(jì)范.  國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊. 1995(03)



本文編號：2908313