Wnt家族蛋白及其受體、調(diào)節(jié)蛋白等共同組成了復(fù)雜的信號通路，在動物的發(fā)育與干細胞命運的調(diào)控方面都起著重要的作用。Wnt信號通路不僅直接促進造血干細胞的自我更新，而且還通過影響造血干細胞微環(huán)境而間接地影響造血干細胞的功能。Wnt家族成員之一Wnt3a在造血干／祖細胞自我更新的過程中發(fā)揮著重要的作用。鑒于此我們通過構(gòu)建攜帶Wnt3a基因的腺病毒感染原代小鼠骨髓基質(zhì)細胞，建立轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細胞。通過與臍血CD34⁺造血干／祖細胞的共培養(yǎng)研究轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細胞擴增CD34⁺造血干／祖細胞的作用。實驗結(jié)果顯示，與普通滋養(yǎng)層加細胞因子組相比，轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層加細胞因子組培養(yǎng)的CD34⁺造血干／祖細胞集落形成能力（CFC）是其1.55±0.06倍；混合集落形成能力是其1.95±0.26倍；高增殖潛能集落形成能力（HPP-CFC）是其1.45±0.40倍；LTC-IC活性是其3.83±0.86倍。結(jié)果表明Wnt3a轉(zhuǎn)基因滋養(yǎng)層細胞通過分泌Wnt3a蛋白，實現(xiàn)其體外擴增造血干／祖細胞的作用。 我們在轉(zhuǎn)Wnt3a滋養(yǎng)層細胞成功培養(yǎng)擴增CD34... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
縮略語表
前言
主要儀器
主要試劑
第一部分 轉(zhuǎn) Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細胞滋養(yǎng)層的建立與檢測
    第一節(jié) Wnt3a基因的克隆
        材料與方法
        實驗結(jié)果
    第二節(jié) pAd-Wnt3a重組腺病毒質(zhì)粒的構(gòu)建
        材料與方法
        實驗結(jié)果
    第三節(jié) 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細胞滋養(yǎng)層的建立
        材料與方法
        實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞擴增作用">第二部分 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細胞滋養(yǎng)層對 CD34⁺造血干/祖細胞擴增作用
    材料與方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞的紅系分化潛能的影響">第三部分 轉(zhuǎn)Wnt3a小鼠骨髓基質(zhì)細胞滋養(yǎng)層對擴增后 CD34⁺造血干/祖細胞的紅系分化潛能的影響
    材料與方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞紅系分化潛能機制的初步探討">第四部分 Wnt3a影響 CD34⁺造血干/祖細胞紅系分化潛能機制的初步探討
    材料與方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻
總結(jié)
致謝
博士期間已完成或發(fā)表的論著
附錄 博士期間發(fā)表的部分論著


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Wnt3a轉(zhuǎn)基因基質(zhì)細胞的建立及其對臍血CD34+造血干/祖細胞擴增作用的研究[J]. 師偉,韓姝,李艷華,謝小燕,施雙雙,陳琳,白慈賢,閆舫,南雪,王韞芳,裴雪濤.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2005(09)
[2]骨髓來源基質(zhì)細胞促進造血重建的實驗研究[J]. 施小鳳,傅晉翔,朱孝中.  中國血液流變學(xué)雜志. 2004(01)



本文編號：2907057