本研究探討體外誘導(dǎo)人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）分化為造血干/祖細(xì)胞的能力。在體外用小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞OP9與人類(lèi)iPSC共培養(yǎng)的方法,將iPSC誘導(dǎo)分化為造血干/祖細(xì)胞;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)造血干/祖細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)水平;用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)分化過(guò)程中iPSC及造血干/祖細(xì)胞的相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平的變化;用免疫磁珠法分離CD34+造血干/祖細(xì)胞并進(jìn)行半固體集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力。結(jié)果表明,iPSC與OP9細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)造血分化的第4天即可觀察到iPSC形態(tài)變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示,分化得到的細(xì)胞表達(dá)已知的造血干/祖細(xì)胞相關(guān)表面標(biāo)志物CD34和CD43分子。在體外分化過(guò)程中多能性的標(biāo)志基因Oct4的表達(dá)逐漸下降,造血相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Gata-2的表達(dá)逐漸升高,而Runx-1的表達(dá)量則呈波浪式變化,CD34表達(dá)量逐漸升高。集落培養(yǎng)14 d能夠得到紅系集落（CFU-E）,粒系集落（CFU-G）,巨核系集落（CFU-M）,粒-巨核系集落（CFU-GM）和混合系集落（CFU-GEMM）。結(jié)論:iPSC細(xì)胞能夠在體外通過(guò)與OP... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2014年01期 第136-141頁(yè) 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    細(xì)胞株來(lái)源
    主要試劑和儀器
    細(xì)胞培養(yǎng)
    i PSC細(xì)胞與OP9 細(xì)胞共培養(yǎng)
    CD34+細(xì)胞的免疫磁珠法分選
    集落形成實(shí)驗(yàn)
    RNA提取和c DNA逆轉(zhuǎn)錄及Q-PCR
結(jié)果
    細(xì)胞的培養(yǎng)與形態(tài)觀察
    誘導(dǎo)造血分化
    流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
    Q-PCR檢測(cè)
    CD34+細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China.  Chinese Medical Journal. 2005(23)



本文編號(hào)：2902305