層粘蛋白不僅是細胞外基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)分子，也是重要的信號分子。層粘蛋白與Ⅳ型膠原蛋白構(gòu)成網(wǎng)狀的細胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)，賦予組織以韌性、彈性、保水性及對機械力的緩沖性，并為細胞提供生存及從事活動的微環(huán)境。層粘蛋白在控制細胞的增殖、參與細胞的遷移、控制細胞分化、促進創(chuàng)傷修復(fù)等方面起傳遞信號的作用。目前在哺乳動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)12種層粘蛋白，每種層粘蛋白都是由α、β和γ構(gòu)成的三聚體，共有5種α鏈，3種β鏈和2種γ鏈。鼠的層粘蛋白的α5鏈在成年組織中廣泛表達，被認為是鼠體內(nèi)的主要的α鏈，α5鏈上的G結(jié)構(gòu)域是其重要的功能域，層粘蛋白的許多的生物功能與其密切相關(guān)。 本實驗采用RT-PCR技術(shù)，應(yīng)用高保真DNA聚合酶成功的從小鼠腎臟中擴增出α5鏈G結(jié)構(gòu)域的E3、LG4、LG5三個基因片段。將PCR產(chǎn)物直接酶切回收，連接到原核表達載體pET-28a（+），構(gòu)建了pET-28a-E3、pET-28a-LG4和pET-28a-LG5三個表達載體。把重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入表達受體菌BL21，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后都獲得了表達，且都以包涵體的表達形式存在，用SDS-PAGE和Western-blot的方法對重組蛋白進行了鑒定。將包涵... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍需大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
第一部分 前言
第二部分 研究內(nèi)容
    實驗一 鼠層粘蛋白α5鏈E3、LG4、LG5 cDNA的克隆表達及多抗的制備
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 實驗流程
            1.3 方法
        2 結(jié)果與討論
        3 小結(jié)
    實驗二 鼠層粘蛋白α5鏈E3、E8片段在畢赤酵母細胞中的表達
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 實驗流程
            1.3 方法
        2 結(jié)果與討論
        3 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
致謝
英文摘要
個人簡歷



本文編號：2902208