背景:Hedgehog信號通路對于多種組織的發(fā)育、動態(tài)平衡以及修復(fù)起了重要的作用,前人的研究強(qiáng)調(diào)了Hedgehog信號對于毛發(fā)模式形成是至關(guān)重要的。目的:探究Hedgehog信號在成年后的毛囊上皮動態(tài)平衡中發(fā)揮的作用。方法:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠、Smofl/fl小鼠與K14-CreER小鼠均來自TheJacksonLaboratory,實(shí)驗(yàn)經(jīng)上海交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物倫理與使用委員會批準(zhǔn),批準(zhǔn)號為1602028。①首先利用Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠特異地標(biāo)記Lgr5+細(xì)胞亞群,確認(rèn)了在Lgr5+毛囊上皮干細(xì)胞/前體細(xì)胞中多個Hedgehog信號通路成員高度富集表達(dá)。而后用Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2小鼠與Smofl/fl小鼠交配得到了Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2;Smofl/fl小鼠;在剛進(jìn)入第二輪長靜息期的P49天進(jìn)行背部剃毛,接著用他莫昔芬誘導(dǎo)Hedgehog信號通路的介導(dǎo)蛋白Smo敲除,觀察在Lgr5+細(xì)胞中敲除Smo對毛發(fā)再生速度的影響;之后實(shí)驗(yàn)在P50-54天他莫昔芬誘導(dǎo)Smo敲除后1周進(jìn)行脫毛,進(jìn)一步評估bulge上皮干細(xì)胞在突變小鼠的功能是否有變化;②用K14-Cre ER小鼠與Smofl/fl小鼠交配以得到K14-CreER; Smofl/fl小鼠,同上實(shí)驗(yàn)方法,在毛囊整個上皮細(xì)胞這一更大范圍內(nèi)用他莫昔芬誘導(dǎo)敲除Smo,觀察是否有毛發(fā)再生障礙及毛囊Bulge干細(xì)胞功能障礙。結(jié)果與結(jié)論:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2; Smofl/fl小鼠模型及K14-CreER; Smofl/fl小鼠模型中均沒有觀測到明顯的毛發(fā)再生障礙,毛囊Bulge干細(xì)胞也沒有受到影響。說明Lgr5+細(xì)胞群和整個毛囊上皮對于Hedgehog信號通路的響應(yīng)與毛囊靜息期向生長期轉(zhuǎn)換以及短期的毛發(fā)再生無關(guān),且與bulge上皮干細(xì)胞的維持也無關(guān)。這一發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了組織發(fā)育和動態(tài)平衡之間的不同分子機(jī)制,為人們更加準(zhǔn)確地理解毛囊再生和組織生長的機(jī)制提供了重要依據(jù)。
【文章目錄】：
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點(diǎn)
    1.3 材料
    1.4 方法
        1.4.1 小鼠模型和小鼠他莫昔芬給藥
        1.4.2小鼠脫毛模型的建立
        1.4.3 組織學(xué)分析
        1.4.4 流式分選
        1.4.5 RNA抽提和Real-time PCR
    1.5 主要觀察指標(biāo)
2 結(jié)果Results
    2.1 Lgr5+細(xì)胞中高表達(dá)Hedgehog信號通路成員
    2.2 Lgr5+細(xì)胞對于Hedgehog信號的響應(yīng)并不影響毛囊靜息期-生長期轉(zhuǎn)換
    2.3 毛囊上皮基底層細(xì)胞對于Hedgehog信號的響應(yīng)與毛囊靜息期-生長期轉(zhuǎn)換無關(guān)
3 討論Discussion

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本文編號：2885004