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rALR對(duì)大鼠單個(gè)核細(xì)胞作用的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-07 17:47
   目的:基于在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中所發(fā)現(xiàn)的rALR在免疫調(diào)節(jié)方面的相關(guān)現(xiàn)象,我們?cè)隗w外實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步觀察rALR在免疫調(diào)節(jié)中的可能作用,并初步探討其相關(guān)機(jī)制。 方法:分離大鼠脾單個(gè)核細(xì)胞,在體外予ConA刺激,并于刺激同時(shí)或先后給予rALR,以~3H-TdR摻入法檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞的增殖,以放免法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-2分泌情況,以AnnexinV法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。分離原代成年Wistar大鼠和新生Wistar大鼠肝細(xì)胞,收集傳代培養(yǎng)的QGY、HK2細(xì)胞,以凍融方式制備四種細(xì)胞膜抗原;分離SD大鼠脾單個(gè)核細(xì)胞,以不同量抗原體外刺激單個(gè)核細(xì)胞,于不同時(shí)間點(diǎn)收集細(xì)胞以~3H-TdR檢測(cè)細(xì)胞增殖。并計(jì)算各時(shí)點(diǎn)刺激組與對(duì)照組摻入值之比,作為刺激指數(shù)。在刺激同時(shí)或終止培養(yǎng)前的48h給予CsA或rALR,于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)收集細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞增殖。 結(jié)果:rALR對(duì)ConA的促淋巴細(xì)胞增殖在5-100ug/ml的濃度范圍內(nèi)有抑制作用,呈量效依賴關(guān)系,在30ug/ml達(dá)50%抑制,100ug/ml達(dá)最大抑制。ConA預(yù)先活化單個(gè)核細(xì)胞10、32h后,給予30ug/ml rALR可產(chǎn)生明顯抑制作用。30ug/ml(ID_(50))的rALR30h預(yù)處理不影響單個(gè)核細(xì)胞對(duì)ConA刺激的反應(yīng)能力。ConA+rALR組的IL-2分泌在24h明 重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 顯低于conA組。rALR(30ug/ml)組的早期凋亡率與總凋亡率在4、 14、30、54h均與對(duì)照組無顯著性差異。Co叭+rALR(30ug/m1)組在14h、 3Oh的早期凋亡低于ConA組,但30h的總凋亡率高于ConA組。濃度 為10ou留ml、30ug/m1的rALR分別以不同程度抑制了成年肝細(xì)胞抗原 和川丈2抗原刺激的反應(yīng)細(xì)胞增殖。對(duì)于HKZ、原代成年大鼠肝細(xì)胞抗 原的預(yù)先刺激,終止培養(yǎng)前的48h加入的兩種濃度的rALR均抑制了反 應(yīng)細(xì)胞的增殖。 結(jié)論:rALR在體外能以劑量依賴性地抑制ConA和特異性抗原誘 導(dǎo)的大鼠脾單個(gè)核細(xì)胞增殖,抑制ConA誘導(dǎo)的IL一2的分泌,這種抑 制作用與凋亡可能沒有直接關(guān)系。未經(jīng)抗原激活的免疫細(xì)胞可能不表 達(dá)ALR受體。
【學(xué)位單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2004
【中圖分類】:R392
【文章目錄】:
英漢縮略名詞對(duì)照表
中文摘要
英文摘要
rALR 對(duì)大鼠脾單個(gè)核細(xì)胞作用的初步研究
    前言
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
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附圖
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致謝
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