【摘要】： 白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）主要由活化的T淋巴細胞 合成并分泌，在免疫系統(tǒng)中它的主要作用是通過結合于T淋巴細 胞上的特異性受體刺激T淋巴細胞克隆性增殖等，對機體起著重 要的免疫調節(jié)功能。 近年來，在中樞神經系統(tǒng)和神經內分泌系統(tǒng)中，發(fā)現(xiàn)有IL-2 或IL-2樣免疫反應陽性物質的表達。例如：有人應用放射免疫法， 測出大鼠的正中隆起、弓狀核、海馬及大腦皮層等腦區(qū)有IL-2樣 免疫活性物質。與此同時，還發(fā)現(xiàn)中樞神經系統(tǒng)和神經內分泌系 統(tǒng)能夠表達IL-2受體（IL-2 receptor，IL-2R）α、β、γ三條鏈，且不 同腦區(qū)IL-2R的分布及密度不同。推測IL-2因而發(fā)揮不同的生理 功能，如IL-2可能具有營養(yǎng)神經元和神經膠質的功能，能夠影響 神經遞質的分泌等。 雌激素主要是由性腺合成及分泌的一種類固醇激素。雌激素 與細胞核內特異性雌激素受體結合，發(fā)揮核轉錄因子樣作用，調 控某些基因的表達水平。業(yè)已發(fā)現(xiàn)雌激素經典的核受體有兩種亞 型，即α亞型和β亞型，此二者在各種組織分布及密度迥異，介導 第四軍醫(yī)大學碩土學位論文 速效應，推測在細胞膜上可能存在與雌激素結合的結構或受體。 雌激素對垂體有重要的反饋調節(jié)作用，不僅影響垂體中促性腺激 素細胞的增殖和激素分泌，而且對其它腺垂體細胞的增殖和激素 的合成以及分泌有重要的作用。 有研究報道，一些鼠源垂體瘤細胞系及人垂體瘤細胞能夠表 達IL－2及其受體，某些因素如M和PMA能夠調控n－2及其 受體的表達。有證據(jù)顯示，正常垂體前葉細胞中存在IL2并表達 其受體。正常大鼠垂體前葉不同細胞中IL．ZR表達的密度依次為 PRL、ACTH、GH細胞。推測IL2在垂體前葉中可能作為旁分 泌或自分泌方式調節(jié)垂體前葉細胞的增殖、影響垂體前葉激素及 某些活性物質的合成及分泌。 此前，我們實驗室以免疫組織化學等方法，發(fā)現(xiàn)在大鼠正常 垂體前葉有IL－2及其受體的兔疫反應陽性物質，垂體前葉中IL2 及其受體的表達有性別差異，雌性大鼠垂體前葉中兀－2及其受體 隨性周期而表現(xiàn)出一定的規(guī)律性。然而，在基因水平，大鼠正常 垂體前葉是否有IL－2存在還未見報道。 我們以前的研究還發(fā)現(xiàn)，在大鼠垂體前葉某些細胞中有n－2 和雌激素受體（ER）兔疫陽性物質共存；IL－2可促進大鼠垂體前 葉細胞＊Ra基因的轉錄活性，而抑制＊邵基因的轉錄活性；在體 條件下，雙側卵巢切除術后，補充雌二醇能夠抑制IL．2樣免疫陽 性物質的表達。在功能研究方面，ILZ對垂體瘤細胞系和人垂體 腺瘤細胞的增殖作用受到雌激素的影響，二卜 對正常大鼠垂體前 葉細胞的增殖調控作用也受到機體雌激素水平變化的影響。這些 研究都提示IL－2和雌激素在調控大鼠垂體前葉細胞功能中有交互 作用。 2 第四軍醫(yī)大學碩士學位論文 作用。 本次實驗目的：從基因水平證實在正常大鼠垂體前葉有IL．2 M的表達，及雌激素對 IL－2 W轉錄的影響。進一步確 證IL－2和雌激素在正常大鼠垂體前葉的相互關系。 在以往的研究基礎上，本實驗采用如下方法： 1．分離正常大鼠的垂體前葉組織，并提取總RNA。 2．正常大鼠垂體前葉進行原代細胞培養(yǎng)5－7天，再從培養(yǎng)細 胞中提取總RNA。 3．將上述提取的總RNA反轉錄成CDNA，再進行PCR 采 用凝膠電泳的方法回收并純化所得的PCR產物，通過DNA 序列分析儀檢測回收的片段，將檢測結果與基因文庫比較 來確定是否為IL－2。 4．挑選20只成年雌性大鼠門00＜ 人 隨機分成4組，每 組5只。每組按照以下進行實驗。 1）正常＋苯甲酸雌H醇組田。） 2）雙側卵巢摘除組＊variectomy3 OVp 3）卵巢摘除＋苯甲酸雌二醇組＊VX＋E。） 4）百巢摘除＋油劑組（OVX＋V） 除第一組不進行手術，其余三組行雙側卵巢切除術， 術后第一組和第三組每日皮下注射苯甲酸雌二醇，第四組 每日皮下注射芝麻油，第二組不進行任何注射。 5．培養(yǎng)兩周后，提取垂體前葉的總RNA，初步測定每個樣 本的RNA含量，隨后取等量的總RNA進行反轉錄，采用內 對照的方法進行半定量RT－PCR，將結果用分析軟件進行分 析。 三 第四軍醫(yī)大學碩士學位論文 結果顯示： 1．從正常大鼠垂體前葉組織提取的RNA中，能夠用PCR的 方法，得到與n－ZMA某一段相同的片段。 2．從正常大鼠垂體前葉培養(yǎng)的細胞中，同樣也能夠用PCR 的方法，得到與 IL－2 InRNA某一段相同的片段。 3．正常雌性大鼠行卵巢切除術后，皮下注射雌二醇比單純 OVX能夠顯著性地抑制 IL－2 ITnNA的表達。 本研究表明，大鼠正常垂體前葉有IL．2 WA的表達，在體 條件下，雌激素能夠影響大鼠正常垂
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R335
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
縮寫詞表
文獻回顧
研究目的
材料和方法
    （一） 實驗材料
    （二） 實驗方法
結果
討論
結論
致謝
參考文獻

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馬晶;于永利;;非受體型酪氨酸激酶蛋白與免疫細胞的信號傳遞[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);1998年03期

本文編號：2856681