目的: 以Klinefelter綜合征患者為研究對(duì)象，從DNA分子水平建立一種研究X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA變異的有效方法，以探討X染色體非整倍體患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA的變異與染色體不分離的關(guān)系。 方法：采用repPCR（representative sampling of multiple repetitive units polymerase chain reaction,rep PCR）方法,通過(guò)設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)囊铮瑢?duì)α-衛(wèi)星DNA多拷貝的2kb串聯(lián)重復(fù)單位（tandem repeat unit）同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)合DNA序列分析，檢測(cè)串聯(lián)重復(fù)單位中變異發(fā)生的頻率及位點(diǎn)。 結(jié)果：擴(kuò)增產(chǎn)物中出現(xiàn)了1774bp、1411bp、570bp、562bp和220bp共5個(gè)片段（后3個(gè)片段是片段缺失而產(chǎn)生的變異片段），其中正常男性、女性組與異常組的每個(gè)樣本均有1774bp、1411bp擴(kuò)增，異常組的570bp、562bp、220bp構(gòu)成比均高于正常男性、女性組，χ2統(tǒng)計(jì)差別有顯著性意義（P﹤0.05）。Logistic回歸分析顯示：570bp、562bp和220bp三個(gè)短片段同時(shí)出現(xiàn)和任兩個(gè)短片段同時(shí)出現(xiàn)均是疾病相關(guān)的危險(xiǎn)因素，且三個(gè)短片段同時(shí)出現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)比（OR值）大于任兩個(gè)短片段同時(shí)出現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)比（OR值）。通過(guò)測(cè)序找到了1774bp 及 WP=8 1411bp DNA序列內(nèi)部由于片段缺失而分別產(chǎn)生570bp、562bp和220bp的重組位點(diǎn)。 結(jié)論：核型正常個(gè)體與Klinefelter綜合征患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA中均存在變異片段，但Klinefelter綜合征患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA表現(xiàn)出較正常人更頻繁的變異片段，而且有三個(gè)重組熱點(diǎn)，并首次發(fā)現(xiàn)兩個(gè)重組熱點(diǎn)。三個(gè)或任兩個(gè)變異片段同時(shí)出現(xiàn)是與非整倍體患者有關(guān)的危險(xiǎn)因素，且三個(gè)變異片段同時(shí)出現(xiàn)比任兩個(gè)變異片段同時(shí)出現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)比高。我們認(rèn)為X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA中變異片段頻率的增加，可能是導(dǎo)致X染色體非整倍性畸變的重要原因之一。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：Q987
【部分圖文】：

重 慶 醫(yī) 科 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文及核型正常個(gè)體的 X 染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星 DNA 串聯(lián)重復(fù)單位進(jìn)行分析，探索著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星 DNA 串聯(lián)重復(fù)單位是否發(fā)生變異以及變異的程度、特點(diǎn)，進(jìn)而探討這種變異與染色體不分離的關(guān)系等，從 DNA 分子水平上為研究染色體不分離或丟失的機(jī)制提供了一個(gè)新的思路和手段。

Klinefelter綜合征G顯帶(×100)

正常男性G顯帶(×100)
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 黃蕾;人類著絲粒結(jié)構(gòu)及功能研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);2000年01期

本文編號(hào)：2851394