目的: 以Klinefelter綜合征患者為研究對象，從DNA分子水平建立一種研究X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA變異的有效方法，以探討X染色體非整倍體患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA的變異與染色體不分離的關系。 方法：采用repPCR（representative sampling of multiple repetitive units polymerase chain reaction,rep PCR）方法,通過設計適當的引物，對α-衛(wèi)星DNA多拷貝的2kb串聯重復單位（tandem repeat unit）同時進行擴增，結合DNA序列分析，檢測串聯重復單位中變異發(fā)生的頻率及位點。 結果：擴增產物中出現了1774bp、1411bp、570bp、562bp和220bp共5個片段（后3個片段是片段缺失而產生的變異片段），其中正常男性、女性組與異常組的每個樣本均有1774bp、1411bp擴增，異常組的570bp、562bp、220bp構成比均高于正常男性、女性組，χ2統計差別有顯著性意義（P﹤0.05）。Logistic回歸分析顯示：570bp、562bp和220bp三個短片段同時出現和任兩個短片段同時出現均是疾病相關的危險因素，且三個短片段同時出現的優(yōu)勢比（OR值）大于任兩個短片段同時出現的優(yōu)勢比（OR值）。通過測序找到了1774bp 及 WP=8 1411bp DNA序列內部由于片段缺失而分別產生570bp、562bp和220bp的重組位點。 結論：核型正常個體與Klinefelter綜合征患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA中均存在變異片段，但Klinefelter綜合征患者的X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA表現出較正常人更頻繁的變異片段，而且有三個重組熱點，并首次發(fā)現兩個重組熱點。三個或任兩個變異片段同時出現是與非整倍體患者有關的危險因素，且三個變異片段同時出現比任兩個變異片段同時出現的優(yōu)勢比高。我們認為X染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星DNA中變異片段頻率的增加，可能是導致X染色體非整倍性畸變的重要原因之一。
【學位單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2004
【中圖分類】：Q987
【部分圖文】：

重 慶 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文及核型正常個體的 X 染色體著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星 DNA 串聯重復單位進行分析，探索著絲粒區(qū)α-衛(wèi)星 DNA 串聯重復單位是否發(fā)生變異以及變異的程度、特點，進而探討這種變異與染色體不分離的關系等，從 DNA 分子水平上為研究染色體不分離或丟失的機制提供了一個新的思路和手段。

Klinefelter綜合征G顯帶(×100)

正常男性G顯帶(×100)
【參考文獻】

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1 黃蕾;人類著絲粒結構及功能研究進展[J];國外醫(yī)學.遺傳學分冊;2000年01期

本文編號：2851394