【摘要】：目的：本研究運(yùn)用TRAP-ELISA法檢測卵巢顆粒細(xì)胞中端粒酶活性的表達(dá)，以及在HCG、FSH、dbcAMP、Verapamil、反義c-myb ODN作用下端粒酶表達(dá)的變化，并探討端粒酶活性與顆粒細(xì)胞E2、P0分泌量及顆粒細(xì)胞增殖變化之間的關(guān)系，為進(jìn)一步了解卵巢的功能及其調(diào)控增添新資料，為開辟新的促生育尤其是治療和預(yù)防卵巢功能早衰及抗生育途徑提供新的方法。 方法：分別用外源性激素已烯雌酚及孕馬血清促性腺激素制備竇前期及排卵前期卵巢模型，收集顆粒細(xì)胞，并將其與HCG、FSH、dbcAMP、Verapamil、反義c-myb ODN共培養(yǎng)，最后再次收集顆粒細(xì)胞，采用TRAP-ELISA法及聚丙烯酰胺電泳銀染法檢測端粒酶活性及其水平的變化。用放射免疫分析法測定培養(yǎng)基中E2、P0含量并同步用MTT法測定顆粒細(xì)胞增殖指數(shù)，分析它們與端粒酶活性之間的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果：（1） 正常卵巢組織中有端粒酶活性存在，并且竇前期卵巢顆粒細(xì)胞端 粒酶活性明顯強(qiáng)于排卵前期卵巢顆粒細(xì)胞。OD450－OD690值于排卵前卵巢顆 粒細(xì)胞中為1.420± 0.4237、 竇前期卵巢顆粒細(xì)胞中為2.123±0.009，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）。 （2）在各處理因素中FSH、 HCG、dbcAMP、Verapamil能顯著增強(qiáng)端粒酶活性（P0.01）；而反義c-myb ODN則明顯抑制端粒酶活性（P0.01）。（3）在對顆粒細(xì)胞增殖指數(shù)MTT的測定中我們發(fā)現(xiàn)竇前期卵巢顆粒細(xì)胞的增殖率高于排卵前期卵巢顆粒細(xì)胞組（P0.05）。FSH顆粒細(xì)胞組出 WP=5 現(xiàn)明顯的增殖（P0.01）， Antisense-hTERT ODN，使顆粒細(xì)胞增殖受到明顯的抑制（P0.01）。同時(shí)在竇前期卵巢顆粒細(xì)胞組FSH可部分抵消Antisense-hTERT ODN的抑制作用，此組顆粒細(xì)胞增殖率與空白對照組無差異；而在排卵前期顆粒細(xì)胞組FSH可完全逆轉(zhuǎn)Antisense-hTERT ODN的抑制作用，此組顆粒細(xì)胞仍然呈明顯的增殖狀態(tài)（P0.01）。（4）竇前期卵巢顆粒細(xì)胞組在不同作用因素下的端粒酶活性與它相對應(yīng)的E2分泌量呈正相關(guān)r=0.953, P0.01。 結(jié)論：（1）正常卵巢中表達(dá)有端粒酶活性，且竇前期卵巢顆粒細(xì)胞中端粒酶活性明顯高于排卵前期卵巢顆粒細(xì)胞。（2）端粒酶活性受HCG、FSH、dbcAMP、Verapamil以及反義c-myb ODN的調(diào)控。（3）用MTT法測定表明反義hTERT ODN能明顯抑制顆粒細(xì)胞的增殖。（4）端粒酶活性與竇前期卵巢顆粒細(xì)胞分泌E2功能密切相關(guān)，與竇前期卵巢顆粒細(xì)胞分泌P0功能及排卵前期卵巢顆粒細(xì)胞分泌E2、P0功能均無明顯關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R339.2
【圖文】：

圖 1：竇前期卵巢顆粒細(xì)胞端粒酶表達(dá)示意圖Fig 1: Telomerase activity in preantral ovarian granulosa c泳道 1 為反義 c-myb 組；泳道 2、3 為空白組；泳道 4、5 為 HC道 7、8 為 FSH；泳道 9、10 為 dbcAMP；泳道 11 為 Verapamil

圖 1：竇前期卵巢顆粒細(xì)胞端粒酶表達(dá)示意圖Fig 1: Telomerase activity in preantral ovarian granu泳道 1 為反義 c-myb 組；泳道 2、3 為空白組；泳道 4、道 7、8 為 FSH；泳道 9、10 為 dbcAMP；泳道 11 為 Verap

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2772413