【摘要】： 痛覺的產(chǎn)生起始于外周傷害性刺激作用于傷害感受器而產(chǎn)生的疼痛信號。谷氨酸已被證明是介導(dǎo)脊髓背角中傷害性信號傳遞的重要遞質(zhì)，并有資料表明谷氨酸通過激活其離子型受體(iGluRs)而在外周傷害性感受器的激活過程中發(fā)揮作用。新近的免疫電鏡以及免疫組織化學等形態(tài)學研究顯示，在初級傳入纖維末梢，亦即傷害性感受器的外周端亦有代謝型谷氨酸受體(mGluRs)的表達，它們屬于第Ⅰ組代謝型谷氨酸受體，包括mGluR_1和mGluR_5。本研究采用行為學和功能形態(tài)學的方法(Formalin引起的Fos表達)，試圖從功能上證實分布在初級傳入神經(jīng)元外周軸突上的mGluRs參與傷害感受器的激活，在外周痛信號的產(chǎn)生中發(fā)揮重要作用。 實驗在Wistar大鼠(100-120g)進行。本實驗分為兩部分，第一部分是在實驗大鼠同時觀察兩個痛反應(yīng)指標，即福爾馬林腳掌注射引起的行為學改變以及福爾馬林腳掌注射引起的脊髓背角Fos蛋白的表達。實驗動物分成三組，兩個實驗組和一個對照組(每組n=5)。實驗組動物 山西醫(yī)科大學 的一側(cè)后腳掌分別注入 20仍級碩士學位論文 mG 1 uR、、mGluR、的拮抗劑 CPCCOEt(1 OOn二01)/M尸Ep(50nmol)，對照組則在一側(cè)腳掌注入緩沖液 HPEPS(兩種拮抗劑均用HPEPS溶解)。無論對照組還是實驗組，都在注入 藥物(或緩沖液)之后巧分鐘，在同一部位注入F二malin(5%，SOul)， 并立即進行行為學觀察，計算動物舔咬注射側(cè)后腳掌的累計時間，以此 作為福爾馬林注射引起的痛行為反應(yīng)。行為觀察結(jié)束后亦即在福爾馬林 注射后1小時處死動物，用免疫組織化學技術(shù)檢查腰部脊髓(L3一;)背角 中由腳掌注射福爾馬林誘發(fā)的FoS樣免疫陽性(FL工)神經(jīng)元，觀察其在 背角的分布并敞計數(shù)。第二部分實驗則只做FoS表達的免疫組化檢測， 而不進行行為學觀察。實驗大鼠的雙側(cè)腳掌均注入Formali。，在其中的 一側(cè)腳掌則分別注入mGI。R，或mGI叭:的拮抗劑C尸CCOEt/MPE尸。以單純注 射Formal in側(cè)背角的Fos表達(FLI神經(jīng)元)作為對照，對同一脊髓雙 側(cè)背角的FL工進行觀察、記數(shù)并進行比較和統(tǒng)計學處理。 結(jié)果顯示，在第一部分實驗的行為學觀察中，對照組大鼠的行為痛 反應(yīng)由兩個時相組成:注射Formalin后隨即出現(xiàn)持續(xù)約6一9分鐘的痛反 應(yīng)過程，稱之為痛反應(yīng)的第一時相:之后經(jīng)歷9一巧分鐘的一個間歇期， 即此期內(nèi)動物的痛反應(yīng)暫時消失;大約從第巧分鐘起痛反應(yīng)又重復(fù)出現(xiàn) 并持續(xù)約20一40分鐘，稱之為行為痛反應(yīng)的第二時相。在實驗觀察中看 到，腳掌注入CPCCOEt或MPEP可明顯抑制痛行為反應(yīng)的第二時相。數(shù)據(jù) 顯示，，單純注入HEPES的對照組，F(xiàn)ormalin引起的第二項舔咬時間為 293.0土17.15，而在CPCCOEt組和MPEP組分別為223.2土29.45和224.0 山西醫(yī)科大學2003級碩士學位論文 士21.05與對照組相比均有顯著性差異(均為尸0.05)。兩種拮抗劑對痛 行為反應(yīng)的第一時相均無顯著影響。在隨后的免疫組化檢測中發(fā)現(xiàn)， Formal in腳掌注射可引起同側(cè)脊髓背角FoS的大量表達，而且主要分布 在背角淺層。腳掌注入CPCCOEt或MPEP可明顯抑制背角的Fos表達，表 現(xiàn)為FoS樣免疫反應(yīng)(FLI)神經(jīng)元的數(shù)量較對照組顯著降低。FLI細胞 的數(shù)量在對照組的脊髓背角為96.2士1 2.5個，CPCCOEt組和MPEP組則 分別為63.9士16.5個和66.5士16.8個，經(jīng)統(tǒng)計學處理與對照組相比均 呈現(xiàn)顯著性差異(均為P0.05)。在第二部分的實驗觀察中，一側(cè)腳掌 注入CPCCOEt或Mp巨尸后，同側(cè)脊髓背角的l了Ll細胞數(shù)量較對側(cè)(腳掌單 純注入廠ormalm的脊髓側(cè))背角明顯減少。C尸CCOE:組注藥側(cè)背角的比工 細胞數(shù)為62.6士13.9個，而對側(cè)背角的FL_L為89.2士11.吐個(pO，05、; M尸Ep組注藥側(cè)背角的FL工細胞為66.1士12.1個，對側(cè)背角貝11鴿.6士15.6 個(p(0 .05)。 上述結(jié)果表明: l、大鼠后腳掌注射福爾馬林可以同時引起大鼠的行為痛反應(yīng)和脊髓 背角的Fos蛋白表達。 2、腳掌注射福爾馬林引起的行為痛反應(yīng)包括兩個時相。第I組代謝 型谷氨酸受體的拮抗劑CPCCOEt或MPE尸，可以明顯減弱福爾馬林注射引 起的痛行為反應(yīng)的第二相，而對第一相行為反應(yīng)無明顯影響。 3、腳掌注射福爾馬林可以引起脊髓背角淺層FoS蛋白的表達。第工 組代謝型谷氨酸受體的拮抗劑CPCCOEt或MPEP，可以明顯抑制脊髓背角 山西醫(yī)科大學 的Fos蛋白表達。 2003級碩士學位論文 結(jié)論: 存在于初級傳入纖維的第I組mGI。RS，包括mG luR、和mGI。R:，參與 外周傷害性感受器的激活;阻斷第工組mGluRS的激活，可以減少傷害性 痛信號的產(chǎn)生。
【圖文】：

如TTx抵抗的鈉通道，使其開放增加‘’7·’8’。這些作用都可以增加感覺神經(jīng)元的放電而導(dǎo)致痛覺過敏。綜上所述，在外周傷害性感受末稍，第一組mGluRS(也包括iGluRs)可能通過圖1所示的機制激活外}
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R33

【共引文獻】

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2 ;Involvement of group Ⅲ metabotropic glutamate receptors in the modulation of spinal nociceptive signals[J];Neural Regeneration Research;2009年06期

3 祁文秀,盧重讓;MK-801降低鞘內(nèi)注射強啡肽A(1-17)對福爾馬林誘導(dǎo)的大鼠痛反應(yīng)的增強效應(yīng)[J];生理學報;2003年01期

4 李楊;袁斌;唐敬師;;電刺激和損毀丘腦中央下核對大鼠福爾馬林誘發(fā)傷害性行為的影響(英文)[J];生理學報;2007年06期

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本文編號：2650770