【摘要】： 目的 建立結(jié)核桿菌(Mtb)低分子多肽體外激活和擴增人外周血γδT細胞的方法及探討抗原遞呈細胞(APC)在Mtb低分子多肽體外激活人外周血γδT細胞中的作用。方法采用從結(jié)核桿菌中提取的一種耐熱的低分子多肽刺激人外周血PBMC，使γδT細胞在體外選擇性擴增培養(yǎng)，免疫熒光標(biāo)記和流式細胞儀分析γδT細胞的增殖比率；用玻璃平皿粘附和尼龍毛柱純化法，從PBMC中分離獲得單核細胞、B淋巴細胞，然后分別與純化的T細胞共育，在Mtb抗原的刺激下，觀察單核細胞、B細胞對γδT細胞增殖效應(yīng)的影響。結(jié)果 在Mtb抗原的刺激下，培養(yǎng)11d，PBMC中的γδT細胞的比率從3～5％提高至50～80％，細胞總數(shù)增加2～3倍，γδT細胞擴增30～50倍；Mtb低分子多肽在選擇性激活人外周血中γδT細胞時，需要單核細胞、B細胞等APC的存在，但APC可能不起加工、處理和遞呈抗原的作用。結(jié)論Mtb低分子多肽在體外可選擇性活化人外周 中文摘要 血中的Y6T細胞；Y6T細胞識別多肽類抗原時需要輔佐細胞的存在并 具有與鄧T細胞不同的獨特抗原識別方式。
【圖文】：

加lml于24孔板內(nèi)，作為實驗孔;以1.sxloT細胞作為對照。在實驗孔、對照孔中再分別加入Mtb同上培養(yǎng)、計數(shù)、染色，測定YS+T細胞比率。式細胞儀所得的數(shù)據(jù)用WinMDI2.8軟件分析。結(jié)果b多膚抗原可選擇性激活人外周血中移T細胞活化及增殖常情況下，鄧‘T細胞僅占人外周血CD3+T細胞的3一10%。單核細胞、B細胞的條件下，Mtb多膚可選擇性地刺激6十T細胞活化和增殖。培養(yǎng)11d，細胞總數(shù)由(1一2)x](2一5)Xlo6，其中丫5‘T細胞比率可達50一50%，，激活一ld較激活前增殖30一50倍(個體反應(yīng)有不同)，見圖1。:P月MC+Mth·11壓

多膚在體外可選擇性激活PBMc中的Y獷T細胞。培養(yǎng)T細胞上CD69表達率達66.2%;培養(yǎng)1ld，細胞總數(shù)達其中下獷T細胞占62.6%，比激活前增殖37.6倍。用不同3K抑制劑LY294002阻斷細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)分子PI3K的活顯示，LY294002可抑制Y獷T細胞的活化及增殖。每ml細入LY2940020.1、1.0、10林M，培養(yǎng)24h，丫6+T細胞上的表達率分別降至58.3%、54.2和35.3%;培養(yǎng)1ld，各胞總數(shù)分別為3.7x106、3.5xl護和1.6X106個，丫6+T細別為48.5%、45.4%和8.1%，分別增殖23.6、22.7和1.9見圖11一13。PBMC+M卜11已少PBMC+M偽今LYQ.玉.口尸11杏目p
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 黃嵐,陳松華,戴慧敏,劉偉,葛錫銳;磷酸脂配體體外激活人外周血γδT細胞的研究[J];上海免疫學(xué)雜志;2000年01期

本文編號：2606523