【摘要】： 目的 建立結(jié)核桿菌(Mtb)低分子多肽體外激活和擴(kuò)增人外周血γδT細(xì)胞的方法及探討抗原遞呈細(xì)胞(APC)在Mtb低分子多肽體外激活人外周血γδT細(xì)胞中的作用。方法采用從結(jié)核桿菌中提取的一種耐熱的低分子多肽刺激人外周血PBMC，使γδT細(xì)胞在體外選擇性擴(kuò)增培養(yǎng)，免疫熒光標(biāo)記和流式細(xì)胞儀分析γδT細(xì)胞的增殖比率；用玻璃平皿粘附和尼龍毛柱純化法，從PBMC中分離獲得單核細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，然后分別與純化的T細(xì)胞共育，在Mtb抗原的刺激下，觀察單核細(xì)胞、B細(xì)胞對γδT細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響。結(jié)果 在Mtb抗原的刺激下，培養(yǎng)11d，PBMC中的γδT細(xì)胞的比率從3～5％提高至50～80％，細(xì)胞總數(shù)增加2～3倍，γδT細(xì)胞擴(kuò)增30～50倍；Mtb低分子多肽在選擇性激活人外周血中γδT細(xì)胞時(shí)，需要單核細(xì)胞、B細(xì)胞等APC的存在，但APC可能不起加工、處理和遞呈抗原的作用。結(jié)論Mtb低分子多肽在體外可選擇性活化人外周 中文摘要 血中的Y6T細(xì)胞；Y6T細(xì)胞識(shí)別多肽類抗原時(shí)需要輔佐細(xì)胞的存在并 具有與鄧T細(xì)胞不同的獨(dú)特抗原識(shí)別方式。
【圖文】：

加lml于24孔板內(nèi)，作為實(shí)驗(yàn)孔;以1.sxloT細(xì)胞作為對照。在實(shí)驗(yàn)孔、對照孔中再分別加入Mtb同上培養(yǎng)、計(jì)數(shù)、染色，測定YS+T細(xì)胞比率。式細(xì)胞儀所得的數(shù)據(jù)用WinMDI2.8軟件分析。結(jié)果b多膚抗原可選擇性激活人外周血中移T細(xì)胞活化及增殖常情況下，鄧‘T細(xì)胞僅占人外周血CD3+T細(xì)胞的3一10%。單核細(xì)胞、B細(xì)胞的條件下，Mtb多膚可選擇性地刺激6十T細(xì)胞活化和增殖。培養(yǎng)11d，細(xì)胞總數(shù)由(1一2)x](2一5)Xlo6，其中丫5‘T細(xì)胞比率可達(dá)50一50%，，激活一ld較激活前增殖30一50倍(個(gè)體反應(yīng)有不同)，見圖1。:P月MC+Mth·11壓

多膚在體外可選擇性激活PBMc中的Y獷T細(xì)胞。培養(yǎng)T細(xì)胞上CD69表達(dá)率達(dá)66.2%;培養(yǎng)1ld，細(xì)胞總數(shù)達(dá)其中下獷T細(xì)胞占62.6%，比激活前增殖37.6倍。用不同3K抑制劑LY294002阻斷細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)分子PI3K的活顯示，LY294002可抑制Y獷T細(xì)胞的活化及增殖。每ml細(xì)入LY2940020.1、1.0、10林M，培養(yǎng)24h，丫6+T細(xì)胞上的表達(dá)率分別降至58.3%、54.2和35.3%;培養(yǎng)1ld，各胞總數(shù)分別為3.7x106、3.5xl護(hù)和1.6X106個(gè)，丫6+T細(xì)別為48.5%、45.4%和8.1%，分別增殖23.6、22.7和1.9見圖11一13。PBMC+M卜11已少PBMC+M偽今LYQ.玉.口尸11杏目p
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 黃嵐,陳松華,戴慧敏,劉偉,葛錫銳;磷酸脂配體體外激活人外周血γδT細(xì)胞的研究[J];上海免疫學(xué)雜志;2000年01期

本文編號(hào)：2606523