本文關(guān)鍵詞：腎缺血再灌注損傷模型小鼠炎性反應(yīng)信號(hào)相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察小鼠腎臟缺血再灌注后,各個(gè)時(shí)間組血清中炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1、腫瘤壞死因子-a、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-6含量和腎臟組織中TLR4 m RNA、TNF-a m RNA、IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2m RNA的水平變化,并初步探討TLR4與各炎性因子信號(hào)在RIRI過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:建立小鼠腎缺血再灌注損傷模型(使健康雄性C57BL/6小鼠雙側(cè)腎臟血供中斷45分鐘,松開(kāi)夾子使雙腎血流重新灌注)。設(shè)立正常對(duì)照(N)組、假手術(shù)(S)組、腎缺血再灌注I/R 4 h組、I/R 12 h組、I/R 24 h組,(S)組除不中斷血供,其余操作均同手術(shù)組。用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組血清中IL-1、TNF-a、GM-CSF、IL-6的變化。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)法分別檢查各實(shí)驗(yàn)組小鼠腎臟組織中TLR4 m RNA、TNF m RNA、IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的表達(dá)變化。結(jié)果:1.與正常對(duì)照組相比較,腎缺血再灌注I/R 4 h組、I/R 12 h組、I/R24 h組血清中IL-1、IL-6、TNF-a、GM-CSF濃度均增高,且各指標(biāo)的變化趨勢(shì)基本相似,都在I/R 12h組升高最顯著,之后逐漸下降,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.與正常對(duì)照相比較,腎臟組織中TLR4 m RNA、IL-1a m RNA、IL-6m RNA和CSF2 m RNA水平均明顯增高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且TLR4 m RNA與各炎性信號(hào)呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì),均于I/R 12h達(dá)到高峰TNF-a水平無(wú)顯著變化。和(N)組比較,(S)組血清和腎臟組織中各因子含量均沒(méi)有特別變化。分別進(jìn)行TLR4 m RNA與IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的線性相關(guān)分析,結(jié)果顯示TLR4 m RNA與IL-1a m RNA呈顯著正相關(guān)(r=0.793,P=0.002);TLR4 m RNA與IL-6 m RNA呈顯著正相關(guān)(r=0.759,P=0.004);TLR4 m RNA與CSF2 m RNA呈顯著正相關(guān)(r=0.772,P=0.003);本研究尚未發(fā)現(xiàn)TLR4 m RNA與TNF-a m RNA有相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論:1.與對(duì)照組比較,I/R4h組、I/R 12h組、I/R 24h組血清中TNF-a、IL-1、IL-6、GM-CSF水平升高,12h組升高顯著,說(shuō)明在腎缺血再灌注損傷情況下,TNFa、IL-1、IL-6、GM-CSF參與早期腎臟損傷的發(fā)病過(guò)程。2.缺血再灌注后腎組織TLR4 m RNA的表達(dá)水平和IL-1a m RNA、IL-6m RNA和CSF2 m RNA的表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組,且增高趨勢(shì)與這幾個(gè)炎性信號(hào)變化一致,均于12h增高最顯著,隨著再灌注時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)水平又下降。相關(guān)分析表明,缺血再灌注后腎臟組織中TLR4 m RNA的表達(dá)水平與IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的表達(dá)水平有強(qiáng)相關(guān)性,提示Toll樣受體可能通過(guò)介導(dǎo)炎性反應(yīng)信號(hào)通路參與了腎臟缺血再灌注腎臟的損傷過(guò)程,在腎缺血再灌注損傷過(guò)程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。
【關(guān)鍵詞】：缺血再灌注 腫瘤壞死因子-a 白細(xì)胞介素-1 白細(xì)胞介素-6 集落刺激因子 Toll樣受體
【學(xué)位授予單位】：河南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R692;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 第1章 緒論9-28
• 1.1 研究背景9-26
• 1.1.1 腎缺血再灌注損傷概述9
• 1.1.2 腎缺血再灌注損傷的病理機(jī)制9-17
• 1.1.3 腎缺血再灌注損傷與炎性因子17-22
• 1.1.4 Toll樣受體與腎缺血再灌注損傷22-26
• 1.1.5 結(jié)語(yǔ)26
• 1.1.6 展望26
• 1.2 研究目的26
• 1.3 研究意義26-28
• 第2章 材料與方法28-33
• 2.1 研究對(duì)象28
• 2.2 試劑28
• 2.2.1 外科手術(shù)和解剖所用試劑28
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑28
• 2.3 儀器設(shè)備設(shè)置28-29
• 2.4 試驗(yàn)方法29-31
• 2.4.1 動(dòng)物模型的建立29
• 2.4.2 實(shí)驗(yàn)分組29
• 2.4.3 組織標(biāo)本收集29-30
• 2.4.4 血清IL-1、IL-6、TNF-a、GM-CSF指標(biāo)的測(cè)定30-31
• 2.5 腎臟組織IL-1、IL-6、TNF-a、GM-CSF以及TLR4基因的檢測(cè)31-32
• 2.5.1 提取總RNA31
• 2.5.2 逆轉(zhuǎn)錄31-32
• 2.5.3 Real-time PCR32
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理32-33
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-47
• 3.1 血清中各因子的變化33-34
• 3.2 各實(shí)驗(yàn)組腎臟組織中IL-1a m RNA表達(dá)水平的比較34-35
• 3.3 各實(shí)驗(yàn)組腎臟組織中IL-6 m RNA表達(dá)水平的比較35-36
• 3.4 各實(shí)驗(yàn)組腎臟組織中TNF m RNA表達(dá)水平的比較36-37
• 3.5 各實(shí)驗(yàn)組腎臟組織中CSF2 m RNA表達(dá)水平的比較37-38
• 3.6 各實(shí)驗(yàn)組腎臟組織中TLR4 m RNA表達(dá)水平的比較38-39
• 3.7 腎臟組織中TLR4 m RNA與IL-1a m RNA、IL-6 m RNA、TNF m RNA和CSF2 m RNA相關(guān)性分析39-47
• 第4章 討論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 縮略語(yǔ)詞匯表56-57
• 致謝57-58
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳向華;丹參酮配合電針對(duì)脊髓缺血再灌注損傷免疫細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：腎缺血再灌注損傷模型小鼠炎性反應(yīng)信號(hào)相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：259585