【摘要】：目的：核干細(xì)胞因子(nucleostemin，NS)是新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)蛋白，位于干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的核仁上。當(dāng)細(xì)胞處于早期多潛能狀態(tài)增殖時(shí)NS呈高豐度表達(dá)，細(xì)胞開始分化時(shí)它的表達(dá)在細(xì)胞退出細(xì)胞周期之前迅速顯著下調(diào)。它可能扮演了維持干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞自我更新的角色，NS缺失或過度表達(dá)均可使干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖減弱。在造血系統(tǒng)中，NS被發(fā)現(xiàn)表達(dá)于有c-kit~+/lin~-標(biāo)志的骨髓干細(xì)胞中，但在成熟粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞中則沒有。急性白血病是造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，我們應(yīng)用RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)白血病細(xì)胞系HL-60和K562細(xì)胞中NS呈高表達(dá)。RNA干擾(RNA interference，RNAi)是基因轉(zhuǎn)錄后沉默作用(post-transcriptional gene silencing，PTGS)的重要機(jī)制之一，小干擾RNA(small interference RNA，siRNA)能高效特異地阻抑特定基因的表達(dá)。短發(fā)夾狀RNA(short hairpin RNA，shRNA)在胞質(zhì)內(nèi)被核酸酶(Dicer)切割成siRNAs，發(fā)揮對(duì)靶基因的抑制作用。shRNA化學(xué)穩(wěn)定性更高，又可在體外大量合成，易于篩選有效序列。我們?cè)隗w外合成NS特異性短發(fā)夾狀RNA并轉(zhuǎn)染HL-60細(xì)胞，，通過觀察細(xì)胞形態(tài)變化和測(cè)定NS抑制
[Abstract]:Objective: nuclear stem cell factor (NS) is a novel protein located on nucleoli of stem cells and tumor cells. The expression of NS was high when the cells were in the early multipotential state of proliferation, and the expression of NS was down-regulated rapidly and significantly before the cell withdrew from the cell cycle when the cells began to differentiate. It may play a role in maintaining the self-renewal of stem cells and tumor cells. The deletion or overexpression of NS can reduce the proliferation of stem cells and tumor cells. In the hematopoietic system, NS was found to be expressed in bone marrow stem cells with c-kit- / linlin-marker, but not in mature granulocytes and lymphocytes. Acute leukemia is a malignant clonal disease of hematopoietic stem cells. We found that the expression of RNA interference RNAi in leukemia cell lines HL-60 and K562 cells is one of the important mechanisms of post-transcriptional gene silencing. Small interfering RNA (small interference siRNAs can inhibit the expression of specific genes efficiently and specifically. Short hairpin RNA (short hairpin RNAs are cut into siRNAsby nuclease (Dicer) in the cytoplasm. The inhibitory effect of shRNA on target genes is more stable. ShRNA can be synthesized in vitro and is easy to screen out effective sequences. NS specific short hairpin RNA was synthesized and transfected into HL-60 cells in vitro. The changes of cell morphology and the inhibition of NS were observed.
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R346

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本文編號(hào)：2157924