【摘要】：脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)是臨床常見的創(chuàng)傷。外傷性的脊髓損傷危害嚴(yán)重，常導(dǎo)致四肢截癱甚至更嚴(yán)重的后果，，神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)為脊髓損傷患者帶來了希望，也堅(jiān)定了戰(zhàn)勝這一疾病的信心。本研究著眼于脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)、增殖及分化，為將來的自體移植提供了來源方便可靠的種子細(xì)胞，為進(jìn)一步細(xì)胞移植治療SCI打下了一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)一 為探討胚胎大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)分化的特點(diǎn)和規(guī)律，我們利用顯微解剖、無血清細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在E12 SD大鼠的胎鼠脊髓中分離出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞，并進(jìn)行傳代培養(yǎng)。同時(shí)觀察白血病抑制因子(LIF)對(duì)培養(yǎng)的脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響。采用細(xì)胞免疫化學(xué)熒光方法進(jìn)行分化細(xì)胞類型鑒定，并計(jì)算各分化細(xì)胞的比例。結(jié)果證實(shí)： 1．從E12天SD大鼠胚胎脊髓中成功分離出的神經(jīng)干細(xì)胞具有連續(xù)克隆能力，在表皮生長因子(EGF)，堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)的作用下，脊髓源性NSCs快速增殖，形成多細(xì)胞組成的細(xì)胞球，將這些細(xì)胞球分離成單細(xì)胞重新培養(yǎng)，單個(gè)的細(xì)胞又很快變成細(xì)胞球。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)巢蛋白抗原。
[Abstract]:Spinal cord injury (spinal cord injura sci) is a common clinical trauma. Traumatic spinal cord injury is serious, often leading to paraplegia or even more serious consequences. The discovery of neural stem cells brings hope to patients with spinal cord injury, but also strengthens the confidence to overcome the disease. This study focused on the culture, proliferation and differentiation of spinal cord derived neural stem cells, which provided convenient and reliable seed cells for autologous transplantation in the future, and laid a certain experimental foundation for further cell transplantation in the treatment of SCI. In experiment one, we used microanatomy to investigate the characteristics and rules of isolation, culture and in vitro induction of neural stem cells from embryonic rat spinal cord. Serum-free cell culture was used to isolate single cell clone cells from fetal spinal cord of E12 SD rats. The effects of leukemia inhibitor (LIF) on the proliferation and differentiation of cultured spinal cord derived neural stem cells were also observed. The cell types of differentiated cells were identified by immunocytochemistry and the proportion of differentiated cells was calculated. The results showed that: 1. The neural stem cells isolated from the embryonic spinal cord of E12 day SD rats had the ability of continuous cloning. Under the action of epidermal growth factor (EGF),) basic fibroblast growth factor (bFGF), spinal cord derived NSCs proliferates rapidly and forms a cell ball composed of many cells. The cells are separated into single cell and recultured. A single cell quickly turns into a ball of cells. These cells express nestin antigens.
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R329

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本文編號(hào)：2150863