【摘要】： SHP-2是一種存在于哺乳動物體內(nèi)的非跨膜型蛋白酪氨酸磷酸酶，它在調(diào)節(jié)細(xì)胞生物的多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程及控制細(xì)胞活性中發(fā)揮著重要的作用。為研究SHP-2的生物學(xué)功能，我們選擇線蟲(Caenorhabditis elegans)作為模式生物，，應(yīng)用RNA干擾技術(shù)對PTP-2(線蟲中SHP-2)的功能進行了研究。首先，我們設(shè)計并合成引物，利用PCR方法從線蟲的cDNA文庫中擴增出ptp-2基因，克隆到表達(dá)載體pGex-2T中，并在E-coli BL21codonplus pLysS中得到了高效表達(dá)；其次，我們應(yīng)用制備電泳獲得了高純度的GST-PTP-2融合蛋白，并將得到的融合蛋白免疫家兔，得到了有較高特異性的PTP-2多克隆抗體；最后，在上述工作基礎(chǔ)上，我們應(yīng)用RNAi技術(shù)干擾ptp-2基因在野生型線蟲中的表達(dá)，通過對線蟲生物學(xué)表型的研究，我們發(fā)現(xiàn)干擾組線蟲在壽命以及非正常死亡方面均與對照組線蟲有明顯差別，說明PTP-2在調(diào)控線蟲陰道肌肉系統(tǒng)發(fā)育的過程中發(fā)揮了重要的作用，同時也參與壽命相關(guān)的信號傳導(dǎo)通路的調(diào)控。
[Abstract]:SHP-2 is a non-transmembrane protein tyrosine phosphatase which exists in mammalian. It plays an important role in regulating many signal transduction processes and controlling cell activity. In order to study the biological function of SHP-2, (Caenorhabditis elegans) was selected as the model organism, and the function of PTP-2 (SHP-2 in nematode) was studied by RNA interference technique. Firstly, we designed and synthesized primers, amplified ptp-2 gene from cDNA library of nematode by PCR method, cloned it into expression vector pGex-2T, and obtained high expression in E-coli BL21codonplus pLysS. High purity GST-PTP-2 fusion protein was obtained by using preparation electrophoresis, and the fusion protein was immunized to rabbits, and a highly specific PTP-2 polyclonal antibody was obtained. Finally, on the basis of the above work, We used RNAi technique to interfere with the expression of ptp-2 gene in wild nematode. By studying the biological phenotype of nematode, we found that there were significant differences in longevity and abnormal death between the interference group and the control group. It is suggested that PTP-2 plays an important role in regulating the development of vagina muscle system of nematodes, and it is also involved in the regulation of signal transduction pathway related to longevity.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R346

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 劉巍;徐為人;;SHP-2蛋白酪氨酸磷酸酶的研究進展[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2006年09期

2 王磊;秦錫虎;王旭芬;朱峰;;Shp2蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義[J];吉林醫(yī)學(xué);2011年36期

3 徐國彤;;中國干細(xì)胞研究的現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)和機遇[J];前沿科學(xué);2007年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張新;幽門螺桿菌干擾胃黏膜上皮核轉(zhuǎn)錄因子SOX2/Hath1表達(dá)機制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

2 呂輝;REST在乳腺癌中的功能研究[D];中南大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 凌琳;蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞中G蛋白偶聯(lián)受體激酶2的作用及芍藥苷對其的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

2 戴建華;小鼠胚胎附植中NO對子宮內(nèi)膜MMP-9 mRNA表達(dá)的影響[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

3 霍寅萍;激活突變酪氨酸磷酸酶SHP-2參與髓系增殖性疾病的機制探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

4 張鳳英;白血病相關(guān)SHP-2激活突變可能促進白細(xì)胞浸潤及多器官損傷[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

5 王磊;Shp2蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義[D];蘇州大學(xué);2010年

本文編號：2146093