【摘要】：背景:N-乙�；D移酶1(NAT1)是廣泛分布于人體內呈多態(tài)性表達的酶類。其基因型和表型在人群中分布情況均存在變化。某些藥物(對氨基苯甲酸,5-氨基水楊酸)體內經NAT1同工酶代謝,目前認為可以應用這些底物評估不同個體NAT1乙酰化代謝多態(tài)性對臨床藥物治療疾病的影響。目的:探討漢族人群中NAT1基因多態(tài)性的分布特點,以及基因型和表型之間的相關分析。同時研究對氨基苯甲酸(PABA)對部分表型NAT1活性及NAT1 mRNA的影響。方法:收集140例漢族健康人的外周血,應用PCR(聚合酶鏈反應)、RFLP(限制性片段長度多態(tài)性分析)及多重PCR技術,進行NAT1等位基因分型研究。同時選擇PABA作為特異底物檢測外周血白細胞中NAT1的活性,代謝產物測定采用高效液相色譜(HPLC)方法。通過提取部分NAT1表型外周血中的淋巴細胞進行培養(yǎng),觀察不同濃度PABA(2、6、18uM)在不同時間(24h、48h、72h)對NAT1活性及NAT1 mRNA水平的影響,NAT1 mRNA分析采用RT-PCR方法。結果:聯(lián)合應用PCR-RFLP及多重PCR方法可避免多種限制性內切酶之間的相互干擾,可準確區(qū)分不同NAT1基因型。在140例檢測標本中,NAT1*3,NAT1*4,NAT1*10和NAT1*11的發(fā)生頻率分別是8.2%,49.6%,40%和2.2%。NAT1*4的發(fā)生率明顯低于歐美人群,但高于東南亞和非洲人群;而NAT1*10的發(fā)生率高于歐美人群,NAT1*3和NAT1*11的發(fā)生率較低,與大多數(shù)亞洲人群基本一致。從140例檢測標本中選擇32份不同NAT1基因型進行活性檢測,通過計算NAT1內部清除率(Clint)、酶催化反應最大速率(V_(max))和米氏常數(shù)(Km)作為評估依據(jù)。結果發(fā)現(xiàn),與野生型NAT1*4/*4相比,NAT1*4/*10、NAT1*10/*10以及NAT1*10/*3酶活性屬于快代謝表型(p0.05);NAT1*11/*11和NAT1*4/*11酶活性要明顯低于NAT1*4/*10、NAT1*10/*10和NAT1*10/*3(p0.05),而與NAT1*4/*3、
[Abstract]:Background: N- acetyltransferase 1 (NAT1) is a polymorphic enzyme widely distributed in human body. The genotypes and phenotypes varied in the population. Some drugs (p-aminobenzoate 5-aminosalicylic acid) have been metabolized by NAT1 isozyme. It is suggested that these substrates can be used to evaluate the effects of different individuals on the clinical therapeutic effects of NAT1 acetylated metabolic polymorphisms. Objective: to investigate the distribution of NAT1 gene polymorphism and the correlation between genotypes and phenotypes in Han population. The effects of p-aminobenzoic acid (PABA) on NAT1 activity and NAT1 mRNA were also studied. Methods: peripheral blood samples were collected from 140 healthy people of Han nationality. The genotyping of NAT1 allele was studied by polymerase chain reaction (PCR) RFLP (restriction fragment length polymorphism analysis) and multiplex PCR technique. At the same time, PABA was selected as the specific substrate to detect the activity of NAT1 in peripheral blood leukocytes, and the metabolites were determined by high performance liquid chromatography (HPLC). The effects of different concentrations of PABA (2 ~ 6 ~ (18) UM) on the activity of NAT1 and the expression of NAT1 mRNA at different time (24 h ~ 48 h ~ 72 h) were studied by RT-PCR. Results: the combination of PCR-RFLP and multiplex PCR could avoid the interference between restriction endonuclease and distinguish different NAT1 genotypes accurately. In 140 samples, the occurrence frequency of Nat 1O 3, Nat 1O 4 and NAT1T 11 were 8. 2% and 2. 2%, respectively, which were significantly lower than those in European and American population, but higher than those in Southeast Asia and Africa, while the incidence of NAT1 10 was lower than that of European and American population, and the incidence rate of NAT1 / Nat 11 was lower than that of European and American population, and the incidence rate of NAT1 / 10 was significantly lower than that of European and American population, but higher than that of Southeast Asia and Africa, respectively, while the incidence of NAT1 / 10 was higher than that of European and American population. Basically consistent with the majority of Asian people. Thirty two different NAT1 genotypes were selected from 140 samples for activity detection. The internal clearance rate (Clint) of NAT1, the maximum rate of enzymatic catalytic reaction (V _ (max) and Michlet constant (km) were calculated as the basis for the evaluation. The results showed that compared with the wild type NAT1 / Nat 4 / 4, the activities of NAT1 / 10 / 10 / 10 and NAT1 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 of the wild type NAT1 / Nat / 10 / 10 / 10 of Nat 1 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10 / 10
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R394

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 鄭莉莉;仲英娜;;乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶及細胞色素P450 2E1基因多態(tài)性與酒精性肝病易感性的研究[J];中國肝臟病雜志(電子版);2008年01期

2 任為;楊森;;IL23R基因多態(tài)性與漢族人銀屑病易感性關聯(lián)分析[J];安徽醫(yī)科大學學報;2011年08期

3 符自清;周明黎;;親環(huán)素A基因多態(tài)性與急性胰腺炎的相關性研究[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2011年15期

4 顧偉;劉潔琳;溫紹君;;緩激肽受體基因多態(tài)性與高血壓關系的研究進展[J];醫(yī)學研究生學報;2011年06期

5 陳斌;曾志榮;柯斌;許麗霞;吳小琴;;TGFβ1-509C/T基因多態(tài)性與不同中醫(yī)證型胃癌關系的研究[J];廣州中醫(yī)藥大學學報;2011年04期

6 竇貴旺;綦巖;吳志紅;;重慶居民5-HT2A基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓關系[J];生物學雜志;2011年03期

7 蔡高軍;何國平;;內皮脂肪酶與心血管疾病[J];心臟雜志;2011年03期

8 李艾帆;許予明;鄭紅;張曉曼;逄濤;;河南漢族人群eNOS基因VNTR多態(tài)性與缺血性腦血管病的關系[J];中風與神經疾病雜志;2011年05期

9 陳宗瑋;羅丹;周穎;彭維杰;;雌激素受體α基因多態(tài)性與女性相關疾病的研究進展[J];實用臨床醫(yī)學;2011年06期

10 石佳;馬笑雪;;宿主基因多態(tài)性與結核病易感性的相關研究新進展[J];微生物學雜志;2011年03期

相關會議論文 前10條

1 張卓君;姚文;王艷艷;彭詠梅;;母乳中性寡糖濃度與FUT2基因多態(tài)性及其與子代早期生長的關系研究[A];中華醫(yī)學會第十五次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2010年

2 黃玉娟;黃敏;王健怡;;GNB3C825T基因多態(tài)性與小兒血管迷走性暈厥的相關性研究[A];中華醫(yī)學會第十五次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2010年

3 杜紅麗;張細權;;雞熱應激蛋白70基因多態(tài)性[A];第六屆動物遺傳學討論會論文集[C];2002年

4 何春燕;周新;李小明;陳麗達;;基質金屬蛋白酶-3和-12基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征的關系[A];湖北省暨武漢生物化學與分子生物學學會第八屆會員代表大會和第十五次學術年會論文摘要匯編[C];2004年

5 邵凌云;翁心華;胡忠義;靳安佳;張文宏;;自然抗性相關性巨噬細胞蛋白1基因多態(tài)性與重癥肺結核的關系(摘要)[A];中華醫(yī)學會結核病學分會2004年學術會議論文匯編[C];2004年

6 陳穎穎;楊幼林;馬志斌;;潰瘍性結腸炎與IFN-γ基因多態(tài)性的關聯(lián)[A];中華醫(yī)學會第11屆全國內科學術會議論文匯編[C];2007年

7 曹倩;商燕;高敏;姒健敏;朱琴;;炎癥性腸病使用硫唑嘌呤患者TPMT基因多態(tài)性及酶活性檢測臨床價值探討[A];首屆浙江省消化病學術大會論文匯編[C];2008年

8 劉運海;唐建生;;磷酸二酯酶4D基因多態(tài)性與腦梗死的相關性研究[A];第十一屆全國神經病學學術會議論文匯編[C];2008年

9 劉運海;譚若利;;UrotensinⅡ基因多態(tài)性與腦卒中關系的研究[A];第十一屆全國神經病學學術會議論文匯編[C];2008年

10 過建春;施軍平;荀運浩;;HLA-DQA1基因多態(tài)性和HBV感染結局的關聯(lián)[A];全國第3屆中西醫(yī)結合傳染病學術會議暨中國中西醫(yī)結合學會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

相關重要報紙文章 前10條

1 印高樂;趨化激素基因多態(tài)性與氣喘嚴重程度有關[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

2 宋立新;基因多態(tài)性演繹人類生命差異[N];大眾科技報;2000年

3 記者 宋哲民 夏景珉;結合臨床開展基因多態(tài)性研究實現(xiàn)疾病診斷與治療的個體化[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

4 廣州第一軍醫(yī)大學珠江醫(yī)院臨床藥理基地 葉海英 中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所 徐峰;合理用藥 新的指南針[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

5 夢隱;慎服進口藥[N];醫(yī)藥經濟報;2000年

6 張惠娟;藥物基因組學及其在合理用藥中的應用[N];中國醫(yī)藥報;2004年

7 廣州醫(yī)學院 陸志城;醫(yī)生與疾病“溝通”的橋梁[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

8 酈佳鳴；酈章安;藥物基因組學指導合理用藥[N];中國醫(yī)藥報;2004年

9 記者 白毅;中國人群IGF2BP2單核苷酸基因多態(tài)性與2型糖尿病關聯(lián)[N];中國醫(yī)藥報;2010年

10 記者 馮立中　通訊員 朱沛炎;基因多態(tài)性或增糖尿病發(fā)病風險[N];健康報;2011年

相關博士學位論文 前10條

1 張衛(wèi)強;基質金屬蛋白酶-1，-9基因多態(tài)性和肺癌易感性關系的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2005年

2 陳潔莉;脂聯(lián)素及其基因單鏈核苷酸多態(tài)性在正常糖耐量，糖耐量受損和2型糖尿病患者的作用研究[D];天津醫(yī)科大學;2005年

3 曹正國;MMP-1啟動子基因多態(tài)性與牙周炎相關性研究[D];武漢大學;2005年

4 俞水亮;中國人群PRNP基因多態(tài)性分析及朊病毒新突變分子致病機制的初步研究[D];武漢大學;2005年

5 賈妮;急性缺血性中風始發(fā)證候與體質、RAS系統(tǒng)基因多態(tài)性的相關性研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2006年

6 王s，

本文編號：2128655