發(fā)布時(shí)間：2018-07-15 16:28

【摘要】：目的:從美國(guó)加利福尼亞電鰩的電器官中提取純化乙酰膽堿受體(AchR),主動(dòng)免疫Lewis大鼠,復(fù)制實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力(EAMG)動(dòng)物模型。方法:參照國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),利用免疫親和層析技術(shù)提取純化AchR,采用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)蛋白純度,觀察免疫后大鼠每日表現(xiàn),并于初次免疫后第4周、第8周作肌電圖,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取血清,檢測(cè)乙酰膽堿受體抗體AchR-ab,最后處死大鼠,電鏡觀察神經(jīng)肌肉接頭。結(jié)果:模型組大鼠在初次免疫注射后的第17天開始相繼出現(xiàn)肌無(wú)力癥狀,并有三只迅速惡化,一周內(nèi)死亡。模型組其它發(fā)病大鼠經(jīng)肌電圖證實(shí),衰退程度均大于15%,而佐劑組與正常組大鼠均無(wú)表現(xiàn)。模型組AchR-ab高于佐劑組與正常組值,P0.05。電鏡觀察模型組神經(jīng)肌肉接頭處(NMJ)突觸前后膜有改變。 結(jié)論:從美國(guó)加利福尼亞電鰩的電器官中提取純化乙酰膽堿受體,主動(dòng)免疫Lewis大鼠,成功復(fù)制出EAMG模型,為中藥治療重癥肌無(wú)力的研究提供了理想的動(dòng)物模型。
[Abstract]:Aim: to extract and purify acetylcholine receptor (AchR) from electric organ of Torpedo California USA and immunize Lewis rats actively to make experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG) animal model. Methods: AchR was extracted and purified by immunoaffinity chromatography with reference to literature at home and abroad. The protein purity was measured by SDS polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The daily performance of the rats was observed and electromyography was performed at the 4th week and the 8th week after the first immunization. At the end of the experiment, the serum was taken and the acetylcholine receptor antibody AchR-ab. the rats were killed and the neuromuscular junctions were observed by electron microscope. Results: in the model group, myasthenia began to appear on the 17th day after the first immunization, and three rats deteriorated rapidly and died within one week. The other rats in the model group were confirmed by electromyography that the degree of decline was greater than that of the control group, while that of the adjuvant group and the normal group was not. The value of AchR-ab in model group was higher than that in adjuvant group and normal group (P 0.05). The changes of presynaptic membrane at the neuromuscular junction (NMJ) in the model group were observed by electron microscope. Conclusion: isolated and purified acetylcholine receptor from electric organ of Torpedo California USA and immunized Lewis rats successfully to replicate EAMG model which provides an ideal animal model for the treatment of myasthenia gravis with traditional Chinese medicine.
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R-332

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