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SARS冠狀病毒Mc區(qū)的克隆表達及表達蛋白抗原活性研究

發(fā)布時間:2018-06-27 20:32

  本文選題:SARS冠狀病毒 + M蛋白Mc區(qū)。 參考:《第一軍醫(yī)大學》2005年碩士論文


【摘要】:一、研究背景和目的 SARS冠狀病毒(SARS-CoV)是一種新現(xiàn)的病原微生物,屬于巢狀病毒目(Order:Nidovirales)、冠狀病毒科(Family:Coronaviridae)、冠狀病毒屬(Genus:Coronavirus),基因組為單鏈正RNA。SARS-CoV可引起嚴重急性呼吸綜合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS),傳染性強,死亡率高。首發(fā)病例于2002年11月出現(xiàn)在中國廣東,疫情很快波及全球。目前,SARS暫時得到控制,但在SARS防治中許多關(guān)鍵問題尚待解決,如SARS-CoV入侵細胞及致病機制、特異性抗病毒藥物、快速診斷試劑和疫苗的研制等。 研究表明,冠狀病毒S蛋白(棘突蛋白)和M蛋白(膜蛋白)具有免疫原性,能夠誘導中和抗體產(chǎn)生。M蛋白(membrane protein)是最豐富的結(jié)構(gòu)蛋白,它跨膜雙分子層3次,短氨基端在膜外,長羧基端在膜內(nèi),由121個氨基酸組成,被認為是與核蛋白體作用的區(qū)域。 本項研究分析了82株SARS-CoV M基因的變異情況,發(fā)現(xiàn)氨基酸變異主要發(fā)生在膜外和跨膜區(qū)域,膜內(nèi)區(qū)域變異極少。對SARS-CoV M蛋白的B細胞抗原表位進行預測,結(jié)果表明M蛋白的B細胞抗原表位85%以上都位于M蛋白膜內(nèi)區(qū)(Mc蛋白)。另有研究者預測,M蛋白所含T細胞激活表位主要集中在第81-220位氨基酸之間,占84.7%,即主要集中在Mc蛋白區(qū)域內(nèi)。所以,就抗原活性而言,Mc蛋白應是M蛋白的代表區(qū)段,而且Mc蛋白的疏水性小于M蛋白的疏水性,更易于大量體外表達。因此,本項研究將靶蛋白鎖定
[Abstract]:Background and objective SARS Coronavirus (SARS-CoV) is a new pathogenic microorganism. It belongs to order: Nidovirales, Family: Coronaviridae, Genus: Coronavirus. The genome is single-stranded positive RNA.SARS-CoV can cause severe Acute Respiratory Syndrome (SARS). The first case occurred in November 2002 in Guangdong, China, the epidemic quickly spread to the world. At present, SARS has been temporarily controlled, but many key problems remain to be solved in the prevention and treatment of SARS, such as SARS-CoV invasion cells and pathogenesis, specific antiviral drugs, rapid diagnostic reagent and vaccine development, etc. The results show that coronavirus S protein (spinous process protein) and M protein (membrane protein) have immunogenicity, and can induce neutralizing antibody to produce. M protein (membrane protein) is the most abundant structural protein. The long carboxyl terminal, composed of 121 amino acids, is believed to interact with ribosomes. In this study, the variation of 82 SARS-CoV M genes was analyzed. It was found that the amino acid variation mainly occurred in the extracellular and transmembrane regions, and there was very little variation in the intramembrane region. The B cell epitopes of SARS-CoV M protein were predicted. The results showed that more than 85% of B cell epitopes of SARS-CoV M protein were located in the intramembrane region of M protein (Mc protein). Other researchers predicted that the T cell activation epitopes contained in M protein were mainly located between the 81-220 amino acids, accounting for 84.7%, that is, mainly in the Mc protein region. Therefore, in terms of antigen activity, Mc protein should be the representative region of M protein, and the hydrophobicity of Mc protein is less than that of M protein, and Mc protein is more easily expressed in vitro. Therefore, this study locks the target protein
【學位授予單位】:第一軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R373

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本文編號:2075196

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