本文選題：RPTPα + 抗體��； 參考：《吉林大學》2006年碩士論文

【摘要】：受體型蛋白酪氨酸磷酸酶α(Reacptor Protein Tyrosine Phosphataseα,RPTPα)是一種廣泛表達的跨膜受體型蛋白酪氨酸磷酸酶(ProteinTyrosine Phosphatases ,PTPs),能夠在體外對c-Src進行去磷酸化,從而增強c-Src的激酶活性。因此,RPTPα特異性抑制劑能抑制c-Src家族激酶活性,在治療由c-Src家族激酶活性增高引起的腫瘤疾病中具有重要的應用價值。 我們以pT7-RPTPα的序列為模板,克隆了RPTPα的細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域RPTPα-D2,構(gòu)建了原核表達載體pGex-His-C3-RPTPα-D2質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21 Codon plus,進行融合蛋白質(zhì)GST-RPTPα-D2的可溶性高效表達,并利用Sepharose 4B親和層析柱純化該融合蛋白。使用凝血酶消化除去GST蛋白,并用純化后的RPTPα-D2蛋白免疫家兔,制備了RPTPα-D2的多克隆抗體,并對其進行純化,這為進行RPTPα的細胞定位和篩選RPTPα特異性抑制劑奠定了基礎。
[Abstract]:Receptor protein tyrosine phosphatase 偽 (RPTP 偽) is a widely expressed protein tyrosine phosphatases (PTPs), which can dephosphorize c-Src in vitro and enhance the activity of c-Src kinase. Therefore, RPTP 偽 -specific inhibitors can inhibit the activity of c-Src family kinases, and have important application value in the treatment of tumor diseases caused by increased activity of c-Src family kinases. Using the sequence of pT7-RPTP 偽 as template, we cloned the intracellular domain RPTP 偽 -D2 of RPTP 偽, constructed the prokaryotic expression vector pGex-His-C3-RPTP 偽 -D2, transformed it into E. coli BL21 Codon plus. and expressed the fusion protein GST-RPTP 偽 -D2. The fusion protein was purified by Sepharose 4 B affinity chromatography. Using thrombin digestion to remove GST protein and immunizing rabbits with purified RPTP 偽 -D2 protein, the polyclonal antibody of RPTP 偽 -D2 was prepared and purified, which laid a foundation for the cellular localization of RPTP 偽 and the screening of RPTP 偽 specific inhibitors.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R392

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本文編號：2071487