本文選題：中華絨螯蟹 + 食物過敏�。� 參考：《中國免疫學雜志》2014年12期

【摘要】：目的:分析不同方法提取和處理中華絨螯蟹組織的蛋白組分及過敏原組分,為檢測中華絨螯蟹特異性IgE提供最佳抗原制備方法。方法:分別采用PBS提取法、丙酮抽提法和裂解液提取法提取中華絨螯蟹組織蛋白,并用裂解液提取法分別提取加熱前、后的蟹蛋白;采用SDS-PAGE和雙向電泳分析蛋白組分,采用Western blot分析過敏原組分。結果:不同方法提取的蛋白組分、sIgE與蛋白結合的強度和所識別的蛋白組分存在一定差異。PBS提取液蛋白主要分布在94、85、76、66、18kD,丙酮提取液蛋白主要分布在94、85、76、36 kD,裂解液提取液蛋白主要分布在200、125、51、43、38 kD。PBS提取液與sIgE結合的陽性反應條帶主要分布在76、66、53、43、38、18 kD;丙酮提取液主要分布在94、76、66、50、43、38、18 kD;裂解液提取液主要分布在200、105、94、76、43、38、18 kD。加熱前、后蟹蛋白過敏原組分差別不大。結論:裂解液提取法提取的中華絨螯蟹過敏原更適于制備測定特異性IgE的抗原。加熱不影響蟹過敏原組分和與特異性IgE的結合活性。
[Abstract]:Aim: to analyze the protein and allergen components of Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis) extracted and treated by different methods, and to provide the best preparation method for detecting specific IgE of Eriocheir sinensis (Eriocheir sinensis). Methods: the tissue proteins of Eriocheir sinensis were extracted by PBS extraction, acetone extraction and lytic solution extraction respectively. The allergen components were analyzed by Western blot. Results: there were some differences in the binding strength between Siga E and protein and the protein components recognized by different methods. The protein of PBS extract was mainly distributed in 94 / 85 / 766 / 66 / 666 / 18kD. the protein of acetone extract was mainly distributed in 94 / 85 / 767 / 636kD, and the cleavage solution was mainly distributed in the solution of cleavage. The protein was mainly distributed in the SIgE binding positive reaction bands of the extracted solution of PBS from 2000.125A, 51kD.PBS and Siga, and the acetone solution was mainly distributed in 94A125C7506333818kD, and the cleavage solution was mainly distributed in 2000105C9105C944333388kD, and the protein was mainly distributed in the 94A125C 650333818kDand the acetone extract was mainly distributed in 94105Dand 73333388kD.The protein was mainly distributed in the extract of PBS, which was bound to Siga E, and the protein was mainly distributed in 766. Before heating, there was no significant difference in the components of protein allergens in crab. Conclusion: the allergen of Eriocheir sinensis extracted by lytic solution is more suitable for the preparation of specific IgE antigen. Heating did not affect the allergen composition and specific IgE binding activity of crab.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學醫(yī)學檢驗學院;天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院;
【基金】：國家自然基金項目資助項目(81371882)
【分類號】：R392.8

【參考文獻】

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本文編號：2066148