轉(zhuǎn)錄因子Bach1對人微血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用研究
本文選題:轉(zhuǎn)錄因子Bach + 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞; 參考:《中國病理生理雜志》2014年12期
【摘要】:目的:研究轉(zhuǎn)錄因子Bach1對人微血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。方法:利用小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)下調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞Bach1表達(dá);用Matrigel管腔形成實驗檢測內(nèi)皮細(xì)胞體外血管新生的能力;用Transwell小室法檢測細(xì)胞遷移;用CCK-8法測定細(xì)胞增殖;用實時熒光定量PCR、Western blotting和ELISA法檢測細(xì)胞中血紅素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白的表達(dá)情況;用轉(zhuǎn)染報告基因的方法檢測VEGF基因的轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)果:下調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞Bach1表達(dá)明顯促進(jìn)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和管腔形成能力,對內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力無明顯影響;抑制Bach1表達(dá)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞HO-1 mRNA和蛋白的表達(dá),增加VEGF轉(zhuǎn)錄活性及mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)論:抑制轉(zhuǎn)錄因子Bach1表達(dá)可增加內(nèi)皮細(xì)胞HO-1和VEGF的表達(dá),促進(jìn)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和管腔形成,提示Bach1是負(fù)性調(diào)控血管新生的因子。
[Abstract]:Objective: to study the effect of transcription factor Bach1 on the function of human microvascular endothelial cells (MECs). Methods: the expression of Bach1 in endothelial cells was down-regulated by transfection of small interfering (small interfering RNA-siRNA, the ability of endothelial cell angiogenesis in vitro was detected by Matrigel lumen formation assay, cell migration was detected by Transwell chamber assay, cell proliferation was measured by CCK-8 method. The mRNA and protein expression of heme oxygenase-1 (heme oxygenase 1) and vascular endothelial growth factor (vascular endothelial growth) were detected by real-time fluorescence quantitative blotting and Elisa, and the transcriptional activity of VEGF gene was detected by transfection of reporter gene. Results: down-regulation of Bach1 expression significantly promoted migration and lumen formation of human microvascular endothelial cells, but had no effect on proliferation of endothelial cells, inhibition of Bach1 expression promoted the expression of HO-1 mRNA and protein in endothelial cells. VEGF transcription activity and mRNA and protein expression were increased. Conclusion: inhibiting the expression of transcription factor Bach1 can increase the expression of HO-1 and VEGF in endothelial cells and promote the migration and lumen formation of human microvascular endothelial cells, suggesting that Bach1 is a negative regulation factor for angiogenesis.
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理與病理生理學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81170298;No.81270410) 國家基礎(chǔ)科學(xué)人才培養(yǎng)基金資助項目(No.J1210041) 上海市衛(wèi)生局科研項目(No.c106629)
【分類號】:R363.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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