本文選題：腸道微生態(tài) + 頭孢曲松　； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 長期大量使用廣譜抗生素最直接、最常見的并發(fā)癥就是腸道菌群失調(diào),并由此導(dǎo)致腹瀉或腸道感染已是不爭的事實,臨床上抗生素相關(guān)性腹瀉(AAD)已十分普遍。目前微生態(tài)制劑作為新型治療手段已廣泛用于因腸道菌群失調(diào)引起急慢性腹瀉的治療,其根本目的在于恢復(fù)和穩(wěn)定原有的微生態(tài)平衡。而具體對因抗生素誘導(dǎo)的腸道菌群失調(diào)具有調(diào)整作用的微生態(tài)制劑缺乏且研究報道不一致。 “培菲康”是一種新型的微生態(tài)制劑,有雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌和糞鏈球菌組成。其中嗜酸乳桿菌已有研究證明其具有耐酸、耐膽鹽、黏附及定植抗性等優(yōu)良的生物學(xué)特性。但是,它對抗生素誘導(dǎo)的腸道菌群失調(diào)是否具有調(diào)節(jié)作用目前還未見報道。人和動物腸道附植著大量的微生物,形成復(fù)雜而動態(tài)平衡的微生態(tài)區(qū)系。由于傳統(tǒng)的微生物技術(shù)只能分析可培養(yǎng)的微生物,在研究腸道微生物生態(tài)系統(tǒng)時難免存在不可逾越的缺陷和不足。所以,要準(zhǔn)確評價益生菌制劑對腸道菌群的調(diào)節(jié)功能還需其它方法的補(bǔ)充�；�16S rRNA基因的變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技術(shù)具有直觀、快速和高通量的優(yōu)點,能有效反映復(fù)雜微生物區(qū)系全貌,適合于分析復(fù)雜的微生物菌群,而且目前已被應(yīng)用于腸道微生態(tài)相關(guān)研究。 本實驗以自“培菲康”產(chǎn)品分離的嗜酸乳桿菌為目標(biāo)益生菌,通過連續(xù)5天大劑量抗生素頭孢曲松處理SPF級BALB/c小鼠建立腸道菌群失調(diào)動物模型,運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)PCR-DGGE結(jié)合傳統(tǒng)培養(yǎng)法觀察和分析了此目標(biāo)菌株對腸道菌群失調(diào)的調(diào)整作用。 結(jié)果:(一)腸道菌群失調(diào)動物模型的制備:連續(xù)5天大劑量抗生素頭孢曲松使腸道細(xì)菌乳桿菌、雙歧桿菌、腸桿菌及腸球菌數(shù)量均下降,且停用抗生素一周內(nèi)各檢測菌數(shù)量未能恢復(fù)正常,與正常對照組相比,具有極顯著性差異(P0.01),模型制備成功;(二)嗜酸乳桿菌對腸道菌群失調(diào)的調(diào)節(jié)作用:在成功制備動物模型基礎(chǔ)上,嗜酸乳桿菌治療組乳桿菌、雙歧桿菌有較明顯的恢復(fù),腸桿菌數(shù)量雖也有所恢復(fù)但增長幅度不及乳桿菌和雙歧桿菌,而異常增殖的腸球菌數(shù)量有所下降;DGGE圖譜分析表明,各處理組具有一定程度的相似性并聚為一族,治療組菌群多樣性指數(shù)與自然恢復(fù)組相比,具有極顯著性差異;同時治療組體重、日攝食量等表觀指標(biāo)也均較自然恢復(fù)組要大。實驗結(jié)果證實:此分離的商品化嗜酸乳桿菌對抗生素誘導(dǎo)腸道菌群失調(diào)具有一定的調(diào)節(jié)作用,“培菲康”具有拓展適應(yīng)癥的可能性。
[Abstract]:Long-term extensive use of broad-spectrum antibiotics is the most direct, the most common complication is intestinal flora disorders, and thus lead to diarrhea or intestinal infection is an indisputable fact, clinical antibiotic associated diarrhea has been very common. At present, microecological agents have been widely used in the treatment of acute and chronic diarrhea due to intestinal microflora disorders. The basic purpose of microecological agents is to restore and stabilize the original microecological balance. However, there is a lack of microecological agents that can regulate the intestinal flora disorder induced by antibiotics and the research reports are inconsistent. Peifeikang is a new microecological preparation consisting of Bifidobacterium, Lactobacillus acidophilus and Streptococcus faecalis. Lactobacillus acidophilus has been proved to have good biological characteristics such as acid tolerance, bile salt tolerance, adhesion and colonization resistance. However, whether it can regulate antibiotic-induced intestinal flora disorders has not been reported. A large number of microbes are embedded in human and animal intestines, forming a complex and dynamic microecological flora. Because traditional microbial technology can only analyze culturable microbes, it is inevitable that there are insurmountable defects and deficiencies in the study of intestinal microbial ecosystem. Therefore, it is necessary to evaluate the regulation function of probiotics on intestinal flora accurately. Denaturing gradient gel electrophoresistics (DGGE) based on 16s rRNA gene has the advantages of visual, fast and high throughput, which can effectively reflect the complete picture of complex microflora and is suitable for analyzing complex microbial flora. And it has been applied to the study of intestinal microecology. The aim of this study was to isolate Lactobacillus acidophilus from "Peifeikang" as the target probiotics. The animal model of intestinal dysbacteriosis was established by ceftriaxone, a high-dose antibiotic for 5 days, in SPF BALB / c mice. By using modern molecular biology PCR-DGGE and traditional culture method, the effects of the target strain on intestinal flora disorder were observed and analyzed. Results: 1. Preparation of animal model of intestinal dysbacteriosis: large doses of antibiotics for 5 consecutive days Ceftriaxone makes intestinal bacteria Lactobacillus, The number of Bifidobacterium, Enterobacter and Enterococcus decreased, and the number of detected bacteria did not return to normal within one week after antibiotic withdrawal, compared with the control group. There was a significant difference (P 0.01). The model was successfully prepared. (2) the regulation effect of Lactobacillus acidophilus on intestinal flora imbalance: on the basis of successful animal model, Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium recovered obviously in the treatment group of Lactobacillus acidophilus. Although the number of Enterobacteria recovered, the increase was not as great as that of Lactobacillus and Bifidobacterium, while the number of abnormal proliferating Enterococcus decreased. The results of DGGE analysis showed that each treatment group had a certain degree of similarity and was clustered into one group. The microbial diversity index of the treatment group was significantly different from that of the natural recovery group, and the apparent indexes such as body weight and daily food intake in the treatment group were also larger than those in the natural recovery group. The results showed that the commercial Lactobacillus acidophilus could regulate the disturbance of intestinal flora induced by antibiotics, and Peifeikang had the possibility of expanding the indication.
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R371

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本文編號：2004184