本文選題：淋病奈瑟菌 + 生殖道感染　； 參考：《華中科技大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】： 淋病(gonorrhea)是由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)引起的經(jīng)典性病,1879年由德國人Neisser首次發(fā)現(xiàn)。人類是淋病奈瑟菌唯一的自然宿主,主要通過性接觸而傳播。淋病奈瑟菌可引起泌尿生殖道及多種附屬器官和組織的化膿性感染,包括淋菌性尿道炎或生殖道炎、膀胱炎、前列腺炎、子宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎等多種疾病。妊娠期婦女感染淋病奈瑟菌,可發(fā)生羊膜腔內(nèi)感染,包括胎兒感染。宮內(nèi)感染可導(dǎo)致流產(chǎn),約占自然流產(chǎn)的32%。孕婦感染后,80%以上無明顯癥狀,如果沒有得到及時治療,在分娩過程中,產(chǎn)道的淋病奈瑟菌就會傳播給新生兒,導(dǎo)致新生兒淋菌性結(jié)膜炎,或新生兒淋病。淋病是世界范圍內(nèi)發(fā)病率較高的性傳播疾病之一,據(jù)WHO估計,全球每年新發(fā)病例超過6000萬。我國近二十年16個城市監(jiān)測發(fā)現(xiàn),1987年淋病患者為11,115例,1997年上升為224,331例,1999年達340,960例,年增長率超過30%,淋病發(fā)病率為20.63/10萬。2000年之后開始下降,淋病患者為285,661人,2001年為234,561人,發(fā)病人數(shù)仍位居性病之首。 淋病奈瑟菌的唯一自然宿主是人類,一般情況下非常容易引起人類泌尿生殖道感染,但卻不能感染所有常用實驗動物。靈長類動物雖可部分復(fù)制出人類淋病感染過程,但由于經(jīng)濟及來源等方面的原因并不是理想的模型動物�？茖W(xué)家們曾進行了各種嘗試試圖找到合適的模型動物:早期曾用淋病奈瑟菌感染雞胚,隨后Arko等嘗試用淋病奈瑟菌感染一系列的動物,包括兔、豚鼠等,但是都沒有成功。經(jīng)過長期艱苦的探索后,有研究表明:運用雌激素預(yù)處理小鼠,可短期制造出淋病奈瑟菌感染動物模型,為建立淋病實驗動物模型提供了新思路。本研究在此基礎(chǔ)上通過摸索嘗試建立了一種簡便、易掌握的淋病奈瑟菌感染動物模型,為研究淋病奈瑟菌致病機制及疫苗開發(fā)提供了合適的動物模型。 本研究工作分以下二個部分: 一、淋病奈瑟菌感染動物模型的實驗性研究 采用野生型臨床株淋病奈瑟菌生殖道接種17-β-雌二醇預(yù)處理的雌性BALB/c小鼠,同時腹腔注射抗生素(萬古霉素、鏈霉素)以抑制生殖道共生菌的過度生長。小鼠生殖道拭子接種WGC選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)分離淋病奈瑟菌,取小鼠陰道分泌物涂片Gram染色觀察,并用改良瑞氏染色和姬母薩染色觀察并計數(shù)小鼠陰道分泌物涂片中多形核白細胞(polymorphonuclearleukocytes,PMN)的數(shù)目。受試小鼠生殖道中淋病奈瑟菌平均存活8天(2×106CFU接種量),陰道分泌物涂片Gram染色可見中性粒細胞中吞噬有革蘭陰性雙球菌,小鼠陰道拭子分離培養(yǎng)呈陽性,WGC選擇培養(yǎng)基分離的可疑菌落經(jīng)生化反應(yīng)鑒定為淋病奈瑟菌,受試小鼠發(fā)生了炎癥。 二、淋病奈瑟菌主要外膜蛋白PⅠB疫苗免疫保護性研究 選用清潔級雌性BALB/c小鼠,隨機分為實驗組和對照組。用淋病奈瑟菌PⅠB蛋白疫苗免疫實驗組小鼠,經(jīng)3次加強免疫后,用間接ELISA法測定實驗組小鼠抗淋病奈瑟菌PⅠB蛋白IgG抗體水平,證實其具有較高抗體滴度后按第一部分介紹的方法建立淋病奈瑟菌感染實驗動物模型,實驗組淋病奈瑟菌的存活時間短于對照組,可認為經(jīng)淋病奈瑟菌PⅠB蛋白免疫后,小鼠生殖道清除淋病奈瑟菌的速率明顯加快,產(chǎn)生了免疫保護性。 結(jié)論:成功建立了淋病奈瑟菌感染的動物模型,為研究淋病奈瑟菌的致病機制和疫苗開發(fā)研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Gonorrhoeae (gonorrhea) is a classic venereal disease caused by Neisseria gonorrhoeae (Neisseria gonorrhoeae). It was first discovered by German Neisser in 1879. Human is the only natural host of Neisseria gonorrhoeae, which is transmitted mainly through sexual contact. Neisseria gonorrhoeae can cause a purulent infection of the genitourinary tract and a variety of accessory organs and tissues, including gonococcus Sexual urethritis or genital inflammation, cystitis, prostatitis, cervicitis, endometritis, and other diseases. Pregnant women infected with Neisseria gonorrhoeae, can occur amniotic infection, including fetal infection. Intrauterine infection can lead to abortion, about 80% of pregnant women with spontaneous abortion, more than 80% without obvious symptoms, if not in time. If not in time In the course of the treatment, Neisseria gonorrhoeae of the gonorrhoeae is transmitted to the newborn, resulting in gonococcal conjunctivitis, or neonate gonorrhea. Gonorrhea is one of the world's high incidence of sexually transmitted diseases. According to WHO estimates, more than 60 million new cases are found every year in the world. In China, 16 City monitoring found in the last twenty years, gonorrhea in 1987. The patients were 11115 cases, 224331 cases rose in 1997, 340960 cases in 1999, the annual growth rate was more than 30%. The incidence of gonorrhea fell after 20.63/10 million.2000 years, 285661 in gonorrhea and 234561 in 2001, and the number of diseases was still the first of venereal disease.
The only natural host of Neisseria gonorrhoeae is human. In general, it is very easy to cause human genitourinary tract infection, but it can not infect all the common experimental animals. Though the primate can partially replicate the process of human gonorrhea infection, it is not an ideal model animal because of economic and source reasons. A variety of attempts were made to find the right model animals: early use of Neisseria gonorrhoeae to infect chicken embryos, and then Arko and other strains of Neisseria gonorrhoeae were tried to infect a series of animals, including rabbits and guinea pigs, but all failed. After a long and hard exploration, the study showed that the use of estrogen to pretreat mice could be produced in a short period of time. The animal model of Neisseria disease infected with Neisseria gonorrhoeae has provided a new idea for the establishment of an experimental animal model of gonorrhea. On this basis, a simple and easy mastered animal model of Neisseria gonorrhoeae infection was established on the basis of this study, and a suitable animal model was provided for the study of the pathogenesis of Neisseria gonorrhoeae and the development of the vaccine.
The research work is divided into two parts:
Experimental study on the animal model of Neisseria gonorrhoeae infection
17- beta estradiol pretreated female BALB/c mice were inoculated with Neisseria gonorrhoeae gonorrhoeae in the wild type clinical strain, and antibiotics (vancomycin, streptomycin) were intraperitoneally injected to inhibit the overgrowth of the reproductive tract symbionts. The mouse reproductive swabs were inoculated with WGC selection medium to isolate Neisseria gonorrhoeae, and the vaginal secretions were smeared to Gr in mice. Am staining was used to observe and count the number of polymorphonuclear leukocytes (polymorphonuclearleukocytes, PMN) in the smears of vaginal secretions in mice. The average survival rate of Neisseria gonorrhoeae in the reproductive tract of the mice was 8 days (2 x 106CFU inoculation), and Gram staining of vaginal secretions showed that neutrophils were swallowed in the vaginal secretions. With gram-negative diplococcus, the isolated culture of vaginal swabs in mice was positive. The suspicious colonies separated by the WGC selection medium were identified as Neisseria gonorrhoeae by biochemical reaction, and the mice were inflamed.
Two, the protective immunity of Neisseria gonorrhoeae major outer membrane protein P I B vaccine
The female BALB/c mice of clean grade were randomly divided into experimental group and control group. The mice were immunized with Neisseria gonorrhoeae P B protein vaccine in the experimental group. After 3 times of immunization, the level of IgG antibody of P I B protein of Neisseria gonorrhoeae in experimental group was determined by indirect ELISA method, and the method was proved to have high antibody titer and the method introduced in the first part. The experimental animal model of Neisseria gonorrhoeae infection was established. The survival time of Neisseria gonorrhoeae in the experimental group was shorter than that of the control group. It was considered that after immunization with Neisseria gonorrhoeae P I B protein, the rate of scavenging Neisseria gonorrhoeae in the mouse reproductive tract was obviously accelerated, and the immune protection was produced.
Conclusion: the animal model of Neisseria gonorrhoeae was successfully established, which laid a foundation for studying the pathogenic mechanism and vaccine development of Neisseria gonorrhoeae.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R-332

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本文編號：1996148