本文選題：肺炎支原體 + 膜脂蛋白��； 參考：《武漢大學(xué)》2005年碩士論文

【摘要】：肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae,Mp)作為一種人源致病性支原體,其感染除了引起原發(fā)型非典性肺炎、咽炎、氣管炎、支氣管炎等呼吸道疾病以外,還可引起全身各系統(tǒng)的合并癥。近年來,隨著Mp感染引起全身多臟器的炎性損傷在國內(nèi)外臨床報道的增加,人們對其引起機(jī)體炎性損傷的分子免疫機(jī)制展開了多方面的研究。 研究表明,人體單核吞噬細(xì)胞主要通過TLR2識別支原體膜脂蛋白成分并由NF-kB途徑介導(dǎo)IL-1β、TNF-α、IL-12等促炎性細(xì)胞因子的釋放;而上述前炎性細(xì)胞因子可增強(qiáng)mlCAM-1(CD54)在病灶中相關(guān)細(xì)胞上表達(dá)水平,加重機(jī)體的局部炎性反應(yīng)。為了探討肺炎支原體感染過程中,其膜脂蛋白成分能否通過TLR2誘導(dǎo)呼吸道局部病灶中單核/巨噬細(xì)胞和肺上皮細(xì)胞mlCAM-1表達(dá)水平的上調(diào),為進(jìn)一步闡明肺炎支原體感染所致肺部炎性反應(yīng)機(jī)制奠定基礎(chǔ),本文以肺腺上皮細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞和髓樣單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞作為靶細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡檢測Mp-LAMP刺激組、抗人TLR2功能純化抗體(TL2.1)阻斷組及消化酶處理組的THP-1細(xì)胞mlCAM-1和TLR2的表達(dá)水平;用流式細(xì)胞術(shù)檢測Mp-LAMP不同濃度刺激組、不同時間刺激組及消化酶處理組的A549細(xì)胞mlCAM-1和TLR2的表達(dá)水平以及具有生物學(xué)活性的肺炎支原體刺激后A549細(xì)胞胞內(nèi)TLR2的表達(dá)水平。結(jié)果表明:與對照組相比,不同刺激濃度的Mp-LAMP對THP-1細(xì)胞膜上TLR2及mlCAM-1的表達(dá)均有明顯的上調(diào)作用(P0.05),且表達(dá)水平的增加對Mp-LAMP的刺激具有濃度依耐性;用TL2.1將THP-1細(xì)胞膜上的TLR2阻斷后,Mp-LAMP對mlCAM-1表達(dá)的誘導(dǎo)作用明顯受到抑制(P0.01),其阻斷效果隨TL2.1量的增加而加強(qiáng);相關(guān)分析表明mlCAM-1在THP-1細(xì)胞上的表達(dá)水平與TLR2密切相關(guān)(r=0.989,P0.01);經(jīng)Mp-LAMP作用后,A549細(xì)胞膜上TLR2無任何表達(dá),但mlCAM-1的表達(dá)水平明顯上調(diào)(P0.01),且對Mp-LAMP具有濃度依耐性。隨著Mp-LAMP作用時間的延長,A549細(xì)胞mlCAM-1表達(dá)水平逐漸上升,作用16h時達(dá)到高峰,然后開始下降。酶消化試驗證實Mp-LAMP誘導(dǎo)
[Abstract]:Mycoplasma pneumoniae MP) as a human pathogenic mycoplasma, its infection not only causes primary SARS pneumonia, pharyngitis, bronchitis, bronchitis and other respiratory diseases, but also can cause systemic complications. In recent years, with the increase of the clinical reports of systemic multiple organ injury caused by MP infection, many studies have been carried out on the molecular immune mechanism of the systemic inflammatory injury caused by MP infection. Human mononuclear phagocytes recognize mycoplasma membrane lipoprotein by TLR2 and mediate the release of pro-inflammatory cytokines such as IL-1 尾 TNF- 偽 and IL-12 by NF-kB pathway, and these proinflammatory cytokines can enhance the expression level of mlCAM-1 / CD54) in the relevant cells. Aggravation of the body's local inflammatory response. In order to investigate whether the membrane lipoprotein of mycoplasma pneumoniae infection can induce the upregulation of the expression of mlCAM-1 in the local focus of respiratory tract by TLR2, the expression of mlCAM-1 in the pulmonary epithelial cells and mononuclear cells is up-regulated. In order to further elucidate the mechanism of pulmonary inflammatory response induced by mycoplasma pneumoniae infection, lung adenoepithelial cell line A549 and myeloid monocyte cell line THP-1 were used as target cells. Mp-LAMP stimulation group was detected by flow cytometry and fluorescence microscopy. The expression levels of mlCAM-1 and TLR2 in THP-1 cells were detected by flow cytometry. The expression levels of mlCAM-1 and TLR2 in A549 cells stimulated by different time groups and digested by digestive enzymes, and the expression levels of TLR2 in A549 cells stimulated by Mycoplasma pneumoniae. The results showed that the expression of TLR2 and mlCAM-1 on THP-1 cell membrane was significantly up-regulated by Mp-LAMP at different concentrations compared with the control group, and the increase of Mp-LAMP expression had a concentration-dependent tolerance to Mp-LAMP. The effect of Mp-LAMP on the expression of mlCAM-1 was significantly inhibited after TL2.1 was blocked by TLR2 on THP-1 cell membrane, and the blocking effect was enhanced with the increase of TL2.1. Correlation analysis showed that the expression level of mlCAM-1 in THP-1 cells was closely related to TLR2 0.989P0.01G, but no expression of TLR2 was found in A549 cells treated with Mp-LAMP, but the expression level of mlCAM-1 was significantly up-regulated in THP-1 cells and had concentration-dependent tolerance to Mp-LAMP. With the prolongation of Mp-LAMP, the expression of mlCAM-1 in A549 cells increased gradually, reached its peak at 16 h, and then began to decrease. Enzyme digestion test confirmed Mp-LAMP induction
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R375

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本文編號：1994828