發(fā)布時(shí)間：2018-06-06 17:29

  本文選題：氟化物 + 結(jié)締組織生長因子�。� 參考：《吉林大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)可促進(jìn)軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞(osteoblast,OB)的增殖和分化,在骨骼發(fā)育以及骨量維持方面發(fā)揮重要作用。轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)具有與CTGF相似的生物學(xué)作用,又是CTGF表達(dá)的有效刺激因子。本研究將重點(diǎn)觀察氟化物對(duì)體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞中CTGF mRNA和蛋白表達(dá)的特點(diǎn),嘗試分析氟化物作用下TGF-β和CTGF之間的相互關(guān)系,從而探討在氟化物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞(fibroblast,FB)成骨功能表達(dá)過程中CTGF的作用和作用特點(diǎn),為解釋氟骨癥骨周化骨的發(fā)生機(jī)制提供重要依據(jù)。 以小鼠成纖維細(xì)胞株(L929)和小鼠顱骨成骨樣細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,細(xì)胞培養(yǎng)方法采用二維和三維兩種方法。應(yīng)用ELISA、免疫組化等方法,檢測染氟成纖維細(xì)胞CTGF和TGF-β蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明:(1)染氟可刺激二維和三維培養(yǎng)體系中成纖維細(xì)胞CTGF蛋白的表達(dá),后者在高氟劑量組明顯;(2)PCR檢測結(jié)果顯示,氟化物對(duì)兩種培養(yǎng)體系中成纖維細(xì)胞CTGF mRNA表達(dá)均有一定程度的刺激作用,以高氟劑量組(20mg/L)增加幅度大;(3)染氟對(duì)二維培養(yǎng)的FB中TGF-β蛋白的表達(dá)無明顯增強(qiáng)作用,但在染氟早期即明顯增強(qiáng)三維培養(yǎng)FB中TGF-β蛋白的表達(dá);(4)相同染氟條件下,二維培養(yǎng)中成骨細(xì)胞CTGF mRNA表達(dá)與染氟FB的變化趨勢相似,但增加程度更為明顯。 綜合分析上述結(jié)果,氟化物對(duì)FB中CTGF從mRNA到蛋白的表達(dá)的刺激作用,提示在氟誘導(dǎo)FB成骨過程中,CTGF可能發(fā)揮一定作用,在氟骨癥骨周化骨的發(fā)生機(jī)制的研究中是值得探討的細(xì)胞因子。在氟化物刺激FB中CTGF和TGF-β蛋白的表達(dá)方面,未發(fā)現(xiàn)明顯規(guī)律,可能是二者在氟化物的刺激中缺少內(nèi)在聯(lián)系,但更可能是由于本實(shí)驗(yàn)條件所限,將在進(jìn)一步的研究中探索改進(jìn)加氟劑量和時(shí)間。氟化物僅對(duì)三維培養(yǎng)體系中FB TGF-β蛋白表達(dá)具有刺激作用,說明FB在不同的培養(yǎng)條件下,對(duì)氟化物的反應(yīng)可能會(huì)有所不同,也提示我們?cè)谌痉鶩B的體外研究中,應(yīng)用多種培養(yǎng)方法可能得到比較全面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[Abstract]:Connective tissue growth factor (CTGFs) can promote the proliferation and differentiation of chondrocytes and osteoblasts, and play an important role in bone development and bone mass maintenance. Transforming growth factor- 尾 (TGF- 尾) has similar biological effects as CTGF-and is an effective stimulator for CTGF-expression. This study will focus on the characteristics of CTGF mRNA and protein expression in fibroblasts cultured with fluoride, and try to analyze the relationship between TGF- 尾 and CTGF. To explore the role and characteristics of CTGF in the osteogenic expression of fibroblast FB induced by fluoride. In order to provide an important basis for explaining the mechanism of periosseous bone formation in fluorosis, the mouse fibroblast cell line L929) and the osteoblast-like cells of mouse skull were used as experimental objects. The cell culture methods were two-dimensional and three-dimensional. The expression of CTGF and TGF- 尾 protein in fluorinated fibroblasts was detected by ELISAand immunohistochemistry. The results showed that fluoride could stimulate the expression of CTGF protein in fibroblasts in two and three dimensional culture system. Fluoride could stimulate the expression of CTGF mRNA in fibroblasts to a certain extent, and the TGF- 尾 protein expression in FB cultured in high fluoride dose group (20 mg / L) was increased by 20 mg / L) and the expression of TGF- 尾 protein in FB was not significantly enhanced by fluoride. However, the expression of TGF- 尾 protein in FB was significantly enhanced at the early stage of fluoride exposure, and the expression of CTGF mRNA in osteoblasts was similar to that of FB in two dimensional culture, but the increase was more obvious. The stimulating effect of fluoride on the expression of CTGF from mRNA to protein in FB suggests that CTGF may play a certain role in the process of fluorine-induced osteogenesis of FB, and it is a valuable cytokine in the study of the mechanism of periosseous osteogenesis in fluorosis. The expression of CTGF and TGF- 尾 protein in FB stimulated by fluoride did not show obvious regularity, which may be due to the lack of internal relationship between them, but more likely due to the limitation of the experimental conditions. The improvement of fluorine dose and time will be explored in further studies. Fluoride only stimulates the expression of FB TGF- 尾 protein in three dimensional culture system, which indicates that the reaction of FB to fluoride may be different under different culture conditions. More comprehensive experimental results may be obtained by using various cultivation methods.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：1987540