皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞Toll樣受體4在炎癥和β淀粉樣蛋白形成中的作用(英文)
本文選題:阿爾茨海默病 + 星形膠質(zhì)細(xì)胞; 參考:《生理學(xué)報(bào)》2014年06期
【摘要】:為了探討星形膠質(zhì)細(xì)胞在炎癥和β淀粉樣蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)形成中的作用和可能的分子機(jī)制,本研究通過LPS刺激體外培養(yǎng)大鼠皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞,首先采用實(shí)時(shí)PCR和Western blot方法分別檢測Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、β淀粉樣前體蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)和β-位點(diǎn)APP剪切酶1(β-site APP clearing enzyme 1,BACE1)m RNA及TLR4、NF-κB/P65蛋白水平,而后用免疫熒光法進(jìn)一步證明NF-κB/P65的核易位,ELISA法測定培養(yǎng)上清中TNF-α、IL-1β和Aβ含量。結(jié)果顯示,這些指標(biāo)在LPS刺激后均不同程度地上調(diào)。然而,如果預(yù)先用TLR4抗體處理,與僅用LPS刺激組相比,LPS對NF-κB/P65核易位及培養(yǎng)上清中TNF-α、IL-1β和Aβ含量的刺激作用顯著減弱或消失。結(jié)果表明,星形膠質(zhì)細(xì)胞TLR4可能通過TLR4/NF-κB信號通路在炎癥和Aβ的形成中發(fā)揮重要的作用。
[Abstract]:In order to investigate the role of astrocytes in inflammation and the formation of amyloid 尾 -protein A 尾, and the possible molecular mechanism, the cultured rat cortical astrocytes were stimulated by LPS in vitro. At first, real-time PCR and Western blot were used to detect the protein levels of Toll receptor 4(Toll-like receptor 4, tumor necrosis factor 偽, interleukin-1 尾 -interleukin-1 尾, 尾 -amyloid precursor protein (尾 -APP), 尾 -site APP clearing enzyme 1BACE1mRNA and TLR4NF-魏 B/P65, respectively. Then immunofluorescence assay was used to further prove that the nuclear translocation Elisa method of NF- 魏 B/P65 was used to determine the contents of TNF- 偽 -nil IL-1 尾 and A 尾 in the culture supernatant. The results showed that these indexes were up-regulated in varying degrees after LPS stimulation. However, if TLR4 antibody was pretreated, the stimulation effect of TLR4 on the nuclear translocation of NF- 魏 B/P65 and the contents of TNF- 偽 -IL-1 尾 and A 尾 in the culture supernatant was significantly decreased or disappeared compared with the group stimulated by LPS alone. The results suggest that TLR4 may play an important role in inflammation and A 尾 formation through TLR 4 / NF- 魏 B signaling pathway.
【作者單位】: 南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系;南京醫(yī)科大學(xué)附屬常州市第二人民醫(yī)院病理科;南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院循證醫(yī)學(xué)中心;
【基金】:supported by the Applied Research and Technology Program of Nantong Municipality,Jiangsu Province,China(No.BK2013007) the Project Funded by the Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions(PAPD)(2011),Jiangsu Province,China
【分類號】:R363
【共引文獻(xiàn)】
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