本文選題：基因 + noggin�。� 參考：《山東大學》2005年碩士論文

【摘要】：[目的]Noggin基因是1992年California大學的Harland, R. M.和Smith, W. C.從非洲爪蟾的胚胎中分離出來的,由于將其mRNA注入爪蟾的胚胎可使其頭部明顯增大,因此得名。此后發(fā)現(xiàn)該基因在胚胎發(fā)育中有重要神經(jīng)誘導作用,尤其是誘導外胚層的背側(cè)發(fā)育。Noggin作為胚胎發(fā)育的重要基因,在進化過程中相當保守,在不同的物種間具有高度同源性。它涉及許多的發(fā)育過程,如神經(jīng)管的形成和關(guān)節(jié)軟骨的形成。作為一種內(nèi)源性神經(jīng)誘導信號,它的作用不僅局限于胚胎期,在成年哺乳動物CNS與外周神經(jīng)系統(tǒng)也可檢測到noggin基因的表達。此外,noggin基因亦是目前在體內(nèi)與體外均被證實有神經(jīng)誘導作用的神經(jīng)誘導劑。其神經(jīng)誘導功能主要是通過拮抗骨形成蛋白(bone morphogenetic protein-4, BMP4)的作用實現(xiàn)的。對于神經(jīng)細胞的體外誘導分化研究和實驗國內(nèi)外均有廣泛報道,但通過構(gòu)建人Noggin基因載體并用其誘導分化的研究尚屬領先。 T alpha-1微管蛋白啟動子是一種神經(jīng)細胞特異性啟動子,有選擇的在神經(jīng)干細胞和不成熟的神經(jīng)細胞內(nèi)表達。為了進一步研究noggin基因的神經(jīng)誘導功能和在細胞分化過程中的表達情況,本研究利用基因工程的方法構(gòu)建pCS2+[Tα1]-Noggin載體。使我們可以很便利的研究noggin在活體細胞和組織的生物學特性(基因表達、信號轉(zhuǎn)導、代謝活動等),為下一步進行神經(jīng)移植或基因治療打下基礎。 [方法]應用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)技術(shù),從正常人胎腦組織中擴增出noggin cDNA,并將其連接到T載體上,經(jīng)酶切鑒定無誤后,送公司進行
[Abstract]:[objective] Noggin gene was Harland, R. M. from California University in 1992. And Smith, W. C. Isolated from the embryo of Xenopus laevis, it is named after the embryo injected with mRNA to Xenopus. After that, it was found that this gene plays an important role in the embryonic development, especially the dorsal ectodermal development. Noggin, as an important gene in embryonic development, is quite conserved in the course of evolution and has high homology among different species. It involves many developmental processes, such as the formation of nerve tubes and articular cartilage. As an endogenous neuro-inducible signal, its function is not only limited to embryonic stage, but also the expression of noggin gene can be detected in CNS and peripheral nervous system of adult mammals. In addition, the noggin gene is also a neuroinducer which has been proved to have neuroinductive effects in vivo and in vitro. Its neural induction is mainly achieved by antagonizing the action of bone morphogenetic protein bone morphogenetic protein-4 (BMP4). The research and experiment of neural cell differentiation in vitro have been widely reported at home and abroad, but the research on the construction and differentiation of human Noggin gene vector is still leading. T alpha-1 tubulin promoter is a neuronal specific promoter that is selectively expressed in neural stem cells and immature nerve cells. In order to further study the neural induction function of noggin gene and its expression during cell differentiation, pCS2 [T 偽 1] -Noggin vector was constructed by genetic engineering. So that we can conveniently study the biological characteristics (gene expression, signal transduction, metabolic activity, etc.) of noggin in living cells and tissues, and lay the foundation for the next step of nerve transplantation or gene therapy. [methods] using reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT PCR) technique, noggin cDNA was amplified from normal human fetal brain tissue and ligated to T vector.
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R346

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本文編號：1935963