本文選題：日本血吸蟲 + 凋亡蛋白抑制因子��； 參考：《中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)》2014年03期

【摘要】：為研究日本血吸蟲凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)重組蛋白誘導(dǎo)BALB/c小鼠的免疫保護(hù)效果,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增SjIAP基因,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET-28a(+)-SjIAP,誘導(dǎo)表達(dá)重組SjIAP蛋白,并利用重組蛋白制備兔源多克隆抗體血清。然后,選用SjIAP重組蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA檢測(cè)免疫小鼠血清中的特異性抗體水平,以及免疫小鼠脾臟淋巴細(xì)胞在SjIAP重組蛋白刺激后產(chǎn)生的細(xì)胞因子水平。強(qiáng)化免疫后,將小鼠進(jìn)行血吸蟲尾蚴攻蟲試驗(yàn),感染38 d,進(jìn)行剖殺,計(jì)算蟲體減蟲率及肝臟減卵率。Western blot結(jié)果表明本研究制備的兔源多抗血清能特異性識(shí)別SjIAP重組蛋白。ELISA檢測(cè)表明免疫SjIAP重組蛋白可誘導(dǎo)較高水平的IgG及IgG亞型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3)抗體和IFN-γ、IL-2及IL-4細(xì)胞因子。動(dòng)物試驗(yàn)表明,免疫SjIAP重組蛋白的小鼠與PBS組相比分別獲得了31.5%的減蟲率和37.2%的肝臟減卵率。免疫SjIAP重組蛋白能誘導(dǎo)小鼠獲得一定減蟲和減卵保護(hù)效果,提示血吸蟲凋亡蛋白抑制因子可作為抗血吸蟲病的疫苗候選分子。
[Abstract]:In order to study the immune protection of Schistosoma japonicum inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum SjIAPs recombinant protein on BALB/c mice, the SjIAP gene was amplified by PCR technique, and the recombinant expression plasmid pET-28a (pET-28a) was constructed to induce the expression of recombinant SjIAP protein. Rabbit polyclonal antibody serum was prepared by recombinant protein. Then, BALB/c mice were immunized with SjIAP recombinant protein. The specific antibody levels in serum and cytokines produced by splenic lymphocytes stimulated by SjIAP recombinant protein were detected by ELISA in immunized mice. The mice were infected with Schistosoma cercariae for 38 days. The results of calculating worm reduction rate and liver oocyte reduction rate. Western blot showed that the rabbit polyantiserum prepared in this study could specifically recognize SjIAP recombinant protein. Elisa test showed that immunized SjIAP recombinant protein could induce higher level of IgG and IgG subtype IgG1 / IgG2bG3 antibody. And IL-2 and IL-4 cytokines. Compared with PBS group, 31.5% worm reduction rate and 37.2% liver egg reduction rate were obtained in mice immunized with SjIAP recombinant protein. Immune SjIAP recombinant protein could induce mice to obtain some protective effects of worm reduction and egg reduction, suggesting that the inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum could be used as a vaccine candidate for schistosomiasis.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部動(dòng)物寄生蟲學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30901068)
【分類號(hào)】：R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1933099