本文選題：成骨細(xì)胞 + 堿性磷酸酶　； 參考：《中國組織工程研究》2014年38期

【摘要】：背景:成骨細(xì)胞獲取的方法較多,如何簡便而迅速的獲得高純度的成骨細(xì)胞成為研究的熱點(diǎn)。目的:比較組織塊法、膠原酶消化法、改良膠原酶和胰酶分段消化法體外培養(yǎng)純化乳兔顱骨來源的成骨細(xì)胞結(jié)果及其細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)。方法:取新生24 h內(nèi)新西蘭大白兔乳兔顱蓋骨,采用組織塊法、膠原酶消化法和改良膠原酶和胰酶分段消化法分離獲取兔原代成骨細(xì)胞,并進(jìn)行傳代培養(yǎng)。通過倒置顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察、錐蟲藍(lán)排斥法計(jì)數(shù)活細(xì)胞率及MTT法繪制細(xì)胞生長曲線、茜素紅染色、細(xì)胞培養(yǎng)上清液堿性磷酸酶和骨鈣素檢測、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原免疫組織化學(xué)法和RT-PCR檢測骨鈣素和Ⅰ型膠原mRNA的表達(dá)等對成骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:分離培養(yǎng)的成骨細(xì)胞均一性好、增殖能力強(qiáng),具備成骨細(xì)胞的典型特征,茜素紅染色陽性,Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色陽性,Ⅲ型膠原免疫組織化學(xué)染色陰性,細(xì)胞培養(yǎng)上清液堿性磷酸酶、骨鈣素均有表達(dá),PT-PCR結(jié)果有Ⅰ型膠原蛋白和骨鈣素mRNA表達(dá)。改良膠原酶和胰酶分段消化法較傳統(tǒng)膠原酶消化法有更高的細(xì)胞獲取率,更好的細(xì)胞活性,且比傳統(tǒng)膠原酶消化法耗時(shí)短(P0.05);組織塊法操作方法最為簡單,細(xì)胞活性最高,但是細(xì)胞產(chǎn)出率最低、耗時(shí)最長,不適合用于成骨細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)。用改良的膠原酶和胰酶分段消化法可獲得數(shù)量較多且純度較高的成骨細(xì)胞,可以成為一種相對可靠、有效的原代成骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法。
[Abstract]:BACKGROUND : Osteoblasts were cultured in vitro by collagenase digestion , collagenase digestion and collagenase digestion .
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第四附屬醫(yī)院骨科;
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 練克儉;陳長青;黃立羨;郭林新;張善濤;尹小峰;;皮質(zhì)骨和其他不同來源兔成骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)和生物學(xué)特性比較[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2010年03期

2 那鍵;馬超;霍維玲;秦瑞云;許永;王濤;吳曉東;谷貴山;;雌性乳鼠顱骨來源的成骨細(xì)胞培養(yǎng)方法的建立及其評價(jià)[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

3 王勇平;廖q，

本文編號：1931779