本文選題：miR- + 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞　； 參考：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2014年09期

【摘要】：目的探討微小RNA-1對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響及分化過程中Notch信號分子的表達(dá)變化。方法全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠MSCs并進(jìn)行流式細(xì)胞學(xué)鑒定,miR-1慢病毒載體感染大鼠MSCs(MSCsmiR-1)按培養(yǎng)時間將細(xì)胞分成4組:對照組、培養(yǎng)4、6和15 d組;光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,q PCR檢測miR-1及心肌細(xì)胞特異性基因GATA-4、c Tn I、α-actin表達(dá),免疫熒光檢測c Tn I表達(dá),Western blot檢測α-actin表達(dá);q PCR檢測Notch信號通路相關(guān)基因的表達(dá)變化。結(jié)果原代大鼠MSCs呈長梭形、漩渦狀生長,98%以上細(xì)胞表達(dá)CD44和CD29,不足1%的細(xì)胞表達(dá)CD45。MSCsmiR-1中miR-1表達(dá)水平持續(xù)上升,同時伴隨心肌特異性基因GATA-4、c Tn I和α-actin的表達(dá)逐漸增強,感染4 d后可見c Tn I在部分MSCsmiR-1中表達(dá),同時可檢測到α-actin在MSCsmiR-1中表達(dá);MSCsmiR-1向心肌樣細(xì)胞分化過程中,Notch信號分子Jagged1、Notch1、Notch3和Hey2表達(dá)水平逐漸下調(diào),于15 d時下調(diào)幅度最大。結(jié)論傳導(dǎo)miR-1至大鼠MSCs中可促使其向心肌樣細(xì)胞的分化;且分化過程中伴隨著Notch信號分子Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2表達(dá)水平下調(diào)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of small RNA-1 on the differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocyte-like cells and the expression of Notch signal molecules during differentiation. Methods Rat MSCs was isolated by whole bone marrow adherent culture method and identified by flow cytometry. The cells were divided into 4 groups according to the culture time: control group, cultured for 4 days and 15 days. The expression of miR-1, GATA-4cTnTnI, 偽 -actin was detected by light microscopy, and the expression of 偽 -actin by c Tn I was detected by immunofluorescence. The expression of 偽 -actin was detected by Western blot and the expression of Notch signal pathway was detected by qPCR. Results in primary rat MSCs, CD44 and CD29 were expressed in more than 98% of the cells. The expression of miR-1 in less than 1% of the cells was continuously increased, and the expression of myocardial specific genes GATA-4C TnI and 偽 -actin was gradually increased. After 4 days of infection, the expression of c Tn I was found in some MSCsmiR-1, and the expression of 偽 -actin in MSCsmiR-1 was detected. The expression of Notch signal molecule Jagged1Notch1Notch3 and Hey2 was down-regulated gradually during the differentiation of MSCSMIR-1 into cardiomyocyte-like cells. Conclusion conduction of miR-1 to rat MSCs can induce its differentiation into cardiomyocyte-like cells, and the expression of Notch signal molecule Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2 is down-regulated during the differentiation.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科;南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院江西省高血壓病研究所;
【基金】：江西省自然科學(xué)基金(2010GZY0321) 江西省科技支撐計劃(2010BSA11700) 江西省教育廳青年科學(xué)基金(GJJ12153) 江西省衛(wèi)生廳科技計劃(20111021)
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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5 胡f3e，

本文編號：1920590